培养基的灭菌方法
培养基的灭菌方法
微生物菌种培养液是供微生物菌种生长发育、繁育、新陈代谢的混和养分。因为微生物菌种具备不一样的营养成分种类,对营养元素的规定也不尽相同,加上科学研究的目地不一样,因此培养液的类型许多,应用的原材料也都有差别,但从营养成分视角剖析,微生物菌种培养液中一般带有微生物所必不可少的氮源、氮源、碳酸盐、生长素及其水份等。此外,培养液还应具备适合的pH值、一定的缓存工作能力、一定的氧化还原反应电位差及适合的血浆渗透压。以便做到特殊规定的科学研究,需要开展培养液配置和杀菌,那麼微生物菌种培养液该怎样配置与杀菌呢?
1.配置水溶液
向器皿内添加所用水量的一部分,依照培养液的秘方,称量各种各样原材料,先后添加使其融解,最终补充所需水份,对蛋白胨、肉膏等物质,需加温融解,加温过程中所挥发的水份,应在所有原材料融解后放水补充。
配置固体培养基时,先将所述已选好的液体培养基烧开,再将称好的琼脂添加,再次加温至彻底溶化并持续拌和,以防琼脂黏锅烧糊。
2.调整pH值
用pH试纸(或pH电位计、氢氧根离子浓度值比色计)检测培养液的pH值,如不符需要,能用10%HCl或10%NaOH开展调整,直至调整到秘方规定的pH值才行。
3.过虑
用过滤纸、沙布或棉絮趁着热将已选好的培养液过虑。用沙布过虑时,最好是伸缩成六层,用过滤纸过虑时,可将过滤纸伸缩成瓦菱形,铺在布氏漏斗上过虑。
4.散装
已过虑的培养液应开展散装。假如要制做斜坡培养液,须将培养液散装于试管婴儿中。假如要制做平板电脑培养液或液體、半固体培养基,则须将培养液散装于锥形瓶内。散装时,一手捏松弹簧夹,使培养液排出,另一只手握紧几支试管婴儿或锥形瓶,先后接培养液。散装时,留意不必使培养液黏附支管或瓶塞,以防淋湿棉塞造成霉菌环境污染。装进试管婴儿的培养液量,视试管婴儿和锥形瓶的尺寸及需要而定。一般制做斜坡培养液时,每只15牙周150mm的试管婴儿,约装3~4ml(1/4~1/3试管婴儿高宽比),如制做深层次培养液,每只20牙周220mm的试管婴儿约装12~15ml。每只锥形瓶装进的培养液,一般以其容量的一半为宜。
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