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外源基因连接T载体导入到大肠杆菌,那么外源基因能在大肠杆菌中表达吗?
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外源基因连接T载体导入到大肠杆菌,那么外源基因能在大肠杆菌中表达吗?
▼优质解答
答案和解析
可以的,因为它上面有启动子T7/SP6（哪个我忘记了）.
但是T载体一般不用做表达载体,因为它是靠T-A连接的（T载体上含多个T,PCR产物含多聚A）,读码框未必正确,所以一般是用作中间过渡的载体,后续要把这段基因切下来（你的扩增引物上需要设计酶切位点,保证读码框正确）,换到专门的表达载体去才行.
但是T载体一般不用做表达载体,因为它是靠T-A连接的（T载体上含多个T,PCR产物含多聚A）,读码框未必正确,所以一般是用作中间过渡的载体,后续要把这段基因切下来（你的扩增引物上需要设计酶切位点,保证读码框正确）,换到专门的表达载体去才行.
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