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层析法分离氨基酸的原理是?
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层析法分离氨基酸的原理是?
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二、原理
纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分 配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相 水是固定相,配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相,展层用的有机溶剂是流动相 在层析时,有机溶剂是流动相.展层用的有机溶剂是流动相.在层析时,
将样品点在距滤纸一端约2~的某一处,将样品点在距滤纸一端约 3cm的某一处,的某一处 该点称为原点; 该点称为原点;然后在密闭容器中层析溶剂 沿滤纸的一个方向进行展层,沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基 酸在两相中不断分配.由于分配系数( 酸在两相中不断分配.由于分配系数(Kd) 不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.物质被分离后在纸层析图谱上的位置,物质被分离后在纸层析图谱上的位置,可用 比移值( 来表示.比移值(Rf)来表示.所谓R 是指在纸层析中,所谓 f,是指在纸层析中,从原点至氨基酸 停留点(又称为层析点)中心的距离( ) 停留点(又称为层析点)中心的距离(X)与 原点至溶剂前沿的距离( )的比值.原点至溶剂前沿的距离(Y)的比值.如图
原点到层析点中心的距离 X Rf = = Y 原点到溶剂前沿的距离
在一定条件下(如温度、展层剂的组成、 在一定条件下(如温度、展层剂的组成、 层析纸质量等不变),某种物质的R ),某种物质的 层析纸质量等不变),某种物质的 f 值是常 因此可作为定性依据.数,因此可作为定性依据.由于氨基酸无色,由于氨基酸无色,可利用茚三酮反应使 氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析.氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析.本 实验利用纸层析法分离氨基酸.实验利用纸层析法分离氨基酸.
纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分 配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相 水是固定相,配层析法,其中滤纸纤维上吸附的水是固定相,展层用的有机溶剂是流动相 在层析时,有机溶剂是流动相.展层用的有机溶剂是流动相.在层析时,
将样品点在距滤纸一端约2~的某一处,将样品点在距滤纸一端约 3cm的某一处,的某一处 该点称为原点; 该点称为原点;然后在密闭容器中层析溶剂 沿滤纸的一个方向进行展层,沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基 酸在两相中不断分配.由于分配系数( 酸在两相中不断分配.由于分配系数(Kd) 不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.物质被分离后在纸层析图谱上的位置,物质被分离后在纸层析图谱上的位置,可用 比移值( 来表示.比移值(Rf)来表示.所谓R 是指在纸层析中,所谓 f,是指在纸层析中,从原点至氨基酸 停留点(又称为层析点)中心的距离( ) 停留点(又称为层析点)中心的距离(X)与 原点至溶剂前沿的距离( )的比值.原点至溶剂前沿的距离(Y)的比值.如图
原点到层析点中心的距离 X Rf = = Y 原点到溶剂前沿的距离
在一定条件下(如温度、展层剂的组成、 在一定条件下(如温度、展层剂的组成、 层析纸质量等不变),某种物质的R ),某种物质的 层析纸质量等不变),某种物质的 f 值是常 因此可作为定性依据.数,因此可作为定性依据.由于氨基酸无色,由于氨基酸无色,可利用茚三酮反应使 氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析.氨基酸层析斑点显色,从而作定性分析.本 实验利用纸层析法分离氨基酸.实验利用纸层析法分离氨基酸.
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