讨论请问荧光光谱怎么确定激发波长?

Question

【讨论】请问 荧光光谱 怎么确定激发波长?

Answer 1

在百度上搜了一下,答案如下：
（1） 如果你的仪器有三维扫描功能,那就非常简单了,按照说明书要求去做就可以了.
（2） 如果仪器没有上述功能,一般可将仪器的激发波长(EX)先设定为200nm,然后进行发射波长(EM)模式扫描,(EM)波长范围暂设定为 210－800nm,然后记录所有出现的峰值波长；改变激发波长(EX)后再扫描,如第二次发射图谱中的某个（或某些）峰的位置没有位移（或位移很少）,一般来说这个（或这些）峰就是荧光峰；因为荧光峰的位置是不随激发波长的改变而改变的,仅是峰高（或峰面积）发生改变
（3） 将确定的荧光峰的波长作为发射波长(EM)固定下来,再做激发波长(EX)的扫描,激发波长的范围要小于发射波长（根据斯拖克斯定律）；如果仅出一个峰则很简单确立下来,再将这个波长固定下来重新做真正的发射波长(EM)扫描,可以得到良好的信噪比的结果值；如果做激发波长(EX)扫描后出现几个峰,则需要有经验的选择了,一般选择峰形高度适合并又有一定带宽的峰为激发波长.