转染细胞不表达怎么补救

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转染细胞不表达怎么补救

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靥逦猵Egfp-N1,pIERS 现在是平行做几个基因,转然后,只有空载体和一个基因可以看到绿色荧光,其余均没有,这会是什么原因呢?怎么补救啊?答：需要考虑的问题有：1.你的细胞和转染的方法,是不是你的细胞本身就很难转染,有些细胞用脂质体转染率很低的.在求助时最好告知细胞和具体的转染方法和试剂.2.质粒的纯度和质量：看你使用那种试剂盒提取的,我们的经验是使用Qiagen比国产的一些试剂盒差别很大.3.pEGFP-N1可用来表达融合蛋白,如果你插入的目的基因带终止密码子的话,这时候如果转让率很低的话没有绿色荧光,只有空载有绿色荧光,但是在转染293T时我们发现带终止密码子的载体还可以见到荧光,但比空载明显弱许多,不像空载体一样所有的细胞都带GPF.

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