人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的利用价值．为了增强发酵效果，研究人员拟从牛胃中筛选出纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行研究．请

Question

人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的利用价值．为了增强发酵效果，研究人员拟从牛胃中筛选出纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行研究．请回答下列问题：
（1）在样品稀释和接种的步骤中，下列选项不需要的是___．
A．酒精灯    B．显微镜    C．培养皿    D．无菌水
（2）为了培养上述菌株，选择的培养基配方是___．
A．葡萄糖    B．纤维素    C．氮源    D．纤维素酶    E．琼脂    F．无机盐    G．蒸馏水
（3）为确定得到的纤维素分解菌，还需要进行___的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种．
（4）纯化微生物培养时，可采用两种接种方法．如图为接种后微生物培养的效果图，那么获得图A效果的接种方法是___，进行该操作时，滴加到培养基表明的菌悬液量不宜过多的原因是___．图B效果的接种方法是___．

（5）在纯化菌种时，所用的培养基都需要在接种前用___法进行灭菌．将10⁴倍的稀释液分别涂布到4个平板上培养，每个平板均接种了0.1mL样品．平板的菌落数分别是210、230、470、190，则样品中菌种的数量为___个/mL．

Answer 1

（1）为了防止杂菌污染，接种步骤需要在酒精灯的火焰旁进行，A错误；
B、样品稀释和接种步骤都不需要使用显微镜，B正确；
C、接种步骤中需要用培养皿，C错误；
D、稀释时需要用无菌水，D错误，
故选：B．
（2）分离获得产纤维素酶菌需要使用选择培养基，该培养基为固体培养基，其中必须添加琼脂．该培养基应该以纤维素（秸杆）作为唯一碳源，因此不需要加葡萄糖，另外还需要加入氮源、无菌水、无机盐、生长因子，故选：BCEFG．
（3）为确定得到的纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验．
（4）纯化微生物培养时，可采用两种接种方法，即稀释涂布平板法和平板划线法．图中A采用的稀释涂布平板法，进行该操作时，滴加到培养基表明的菌悬液量不宜过多，原因是培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果．图B采用的平板划线法．
（5）对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法．将10⁴倍的稀释液分别涂布到4个平板上培养，每个平板均接种了0.1mL样品．平板的菌落数分别是210、230、470、190，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，则样品中菌种的数量为(210+230+190)/(3)×(1)/(0.1)×10⁴=2.1×10⁷个/mL．
故答案为：
（1）B
（2）BCEFG
（3）发酵产纤维素酶
（4）稀释涂布平板法   培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果   平板划线法
（5）高压蒸汽灭菌      2.1×10⁷