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如何终止胃蛋白酶继续酶解蛋白质我的试验是利用胃蛋白酶不易酶解β-乳球蛋白的原理,用胃蛋白酶酶解乳清粉,从而分离β-乳球蛋白.在做时间单因素试验时需要及时终止胃蛋白酶的反应,而且
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如何终止胃蛋白酶继续酶解蛋白质
我的试验是利用胃蛋白酶不易酶解β-乳球蛋白的原理,用胃蛋白酶酶解乳清粉,从而分离β-乳球蛋白.在做时间单因素试验时需要及时终止胃蛋白酶的反应,而且不能让β-乳球蛋白变性,有什么好的方法?
我的试验是利用胃蛋白酶不易酶解β-乳球蛋白的原理,用胃蛋白酶酶解乳清粉,从而分离β-乳球蛋白.在做时间单因素试验时需要及时终止胃蛋白酶的反应,而且不能让β-乳球蛋白变性,有什么好的方法?
▼优质解答
答案和解析
胃蛋白酶与β-乳球蛋白在分子量上会存在差异,可以尝试利用这个原理设计分离方法.
如果用于小剂量分析,可以使用离心法,如果分子量差异较小且实验条件允许,可尝试密度梯度离心,分辨效果很好.如果要处理较大量样品,建议使用凝胶过滤法(即分子筛,详细方法可照色谱法的降解材料实施).当然,也可以尝试进一步查资料了解一下二者在电荷上的差异,如果这方面差异足够明显,则建议尝试电泳方法(如琼脂糖凝胶电泳法),一般效果也会比较理想.
以上方法只要操作得当,甚至能保留大部分酶组分的活性也不被破坏
如果用于小剂量分析,可以使用离心法,如果分子量差异较小且实验条件允许,可尝试密度梯度离心,分辨效果很好.如果要处理较大量样品,建议使用凝胶过滤法(即分子筛,详细方法可照色谱法的降解材料实施).当然,也可以尝试进一步查资料了解一下二者在电荷上的差异,如果这方面差异足够明显,则建议尝试电泳方法(如琼脂糖凝胶电泳法),一般效果也会比较理想.
以上方法只要操作得当,甚至能保留大部分酶组分的活性也不被破坏
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