几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解．通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力．回答下列问题：（1）在进行基因工程操作时，若

Question

几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解．通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力．回答下列问题：
（1）在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是___．提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是___．
（2）以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是___．
（3）若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是___（答出两点即可）．
（4）当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是___．
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是___．

Answer 1

（1）由于嫩叶中几丁质酶转录的mRNA较多，因此在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料．提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是防止提取的mRNA被RNA酶分解．
（2）以mRNA为材料可以获得cDNA，原因是mRNA可根据碱基互补配对原则逆转录为cDNA．
（3）若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是：质粒载体中有启动子、终止子，便于目的基因的表达；质粒中有标记基因便于筛选；质粒中含有复制原点等．
（4）DNA连接酶催化形成的化学键是磷酸二酯键．
（5）基因表达包括转录和翻译两个步骤，若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，其可能的原因是几丁质酶基因没有转录或转录的mRNA没有翻译．
故答案为：
（1）嫩叶中几丁质酶转录的mRNA较多      防止提取的mRNA被RNA酶分解
（2）mRNA根据碱基互补配对原则逆转录为cDNA
（3）质粒载体中有启动子、终止子，便于目的基因的表达；质粒中有标记基因便于筛选；质粒中含有复制原点等
（4）磷酸二酯键
（5）几丁质酶基因没有转录或转录的mRNA没有翻译