（2014•宝山区一模）关于生物技术问题草胺磷是一种除草剂．下图是抗草胺磷转基因大豆的培育过程示意图．（1）图中①应为，若②不能在含四环素的培养基上生长，则原因是．

Question

（2014•宝山区一模）关于生物技术问题
草胺磷是一种除草剂．下图是抗草胺磷转基因大豆的培育过程示意图．

（1）图中①应为______，若②不能在含四环素的培养基上生长，则原因是______．
（2）转基因成功的大豆细胞通过组织培养成为转基因大豆植株．抗草胺磷基因在大豆植株内能够高效表达，其高效表达的观察指标是______．
（3）B和C阶段使用不同种培养基，理由是______．
C→D阶段可使用不添加植物激素的培养基理由是______．
（4）从某种蛋白质的氨基酸序列出发，利用______方法获得目的基因，通过基因工程的手段，可以生产自然界中不存在的蛋白质．下列有关基因工程中运载体的描述，正确的是______（多选）．
A．能够在宿主细胞中复制并稳定保存是运载体的必备条件之一
B．一种运载体只能运载一种目的基因
C．使用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等
D．质粒的复制可以在宿主细胞外完成．
（5）图表示某DNA片段上相邻两个基因的分布，基因M、R编码各自蛋白质前三个氨基酸的DNA序列如图，起始密码子均为AUG．该DNA片段中有一个某种限制酶的识别序列，箭头表示切割位点，下列相关叙述正确的是______ （多选）．

A．基因M和基因R转录时的模板链均位于b链上
B．用该限制酶切割时，只能将磷酸二酯键断开，与氢键的断裂无关
C．用该限制酶切割后，DNA片段中有4个游离的磷酸基团
D．对该生物基因组测序时，图中非基因片段的序列也要检测．

Answer 1

（1）由以上分析可知，图中①为重组质粒（重组DNA分子）；质粒上含有四环素抗性基因，因此成功导入重组质粒的农杆菌能在含有四环素的培养基上生存，若②不能在含四环素的培养基上生长，则说明重组质粒未导入农杆菌．
（2）抗草胺磷基因在大豆植株内高效表达的观察指标是大豆植株对草胺磷有抗性．
（3）B表示脱分化过程，C表示再分化过程，决定植物脱分化和再分化的关键是植物激素的种类及比例，因此B和C阶段所使用的培养基中的生长素与细胞分裂素的比值不同．C→D阶段已经形成芽，芽能产生生长素促进根的生长，因此该阶段可使用不添加植物激素的培养基．
（4）从某种蛋白质的氨基酸序列出发，推断出对应的脱氧核苷酸序列，利用人工合成法获得目的基因，通过基因工程的手段，可以生产自然界中不存在的蛋白质．
A、作为基因工程的运载体，要能够在宿主细胞中复制并稳定保存，A正确；
B、一种运载体可以运载多种目的基因，B错误；
C、基因工程常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等，C正确；
D、质粒不能在宿主细胞外完成复制，D错误．
故选：AC．
（5）A、起始密码子（AUG）可知，基因M以b链为模板合成mRNA，而基因R以a链为模板合成mRNA，A错误；
B、限制酶能识别特定的核苷酸序列，并将特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键切断，B正确；
C．该DNA分子中只含有一个该限制酶的切割位点，因此用此限制酶切割后能形成2个DNA片段，每个DNA片段有2个游离的磷酸基团，因此切割后的DNA片段中共有4个游离的磷酸基团，C正确；
D．基因组测序时应该测定全部DNA序列，因此对该生物基因组测序时，图中非基因片段的序列也要检测，D正确．
故选：BCD．
故答案为：
（1）重组质粒（重组DNA分子）　重组质粒未导入（因图中显切点，不能写标记基因被破坏）
（2）大豆植株对草胺磷有抗性
（3）2个阶段培养基中生长素与细胞分裂素的比值不同  因为芽能产生生长素促进根的生长
（4）人工合成（人工方法化学合成）    AC
（5）BCD