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(2014•河东区一模)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示).(1)
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(2014•河东区一模)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示).
![](https://www.zaojiaoba.cn/2018-08/30/1535586704-1233.jpg)
(1)图甲中,过程①需要的酶有______.为达到筛选目的,平板内的固体培养基应加入______.
(2)α-淀粉酶基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间的原因是______.
(3)除了用选择培养基筛选工程菌之外,还可用DNA杂交技术直接鉴定带有重组质粒的酵母菌.具体操作如图乙所示,结合图乙回答一下问题.
![](https://www.zaojiaoba.cn/2018-08/30/1535586705-5708.jpg)
利用PCR技术制备DNA探针,需加入______才能是DNA探针具有放射性.如何根据放射性自显影结果做出判断______.
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(1)图甲中,过程①需要的酶有______.为达到筛选目的,平板内的固体培养基应加入______.
(2)α-淀粉酶基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间的原因是______.
(3)除了用选择培养基筛选工程菌之外,还可用DNA杂交技术直接鉴定带有重组质粒的酵母菌.具体操作如图乙所示,结合图乙回答一下问题.
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利用PCR技术制备DNA探针,需加入______才能是DNA探针具有放射性.如何根据放射性自显影结果做出判断______.
▼优质解答
答案和解析
(1)图甲过程①表示基因表达载体的构建,该过程先要用同种限制性核酸内切酶切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒,再用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来形成重组质粒.普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,而工程酵母菌可以高效利用淀粉,所以用以淀粉为唯一碳源的选择培养基可以选出工程酵母菌.
(2)启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,是基因的一个组成部分,控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度.终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列.因此目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间,使目的基因能够表达和发挥作用.
(3)根据图乙可以看出,该技术利用DNA分子杂交技术,因此利用PCR技术制备的DNA探针需加入同位素.放射性自显影结果表明,该处DNA探针与目的基因发生的互补配对,因此根据光学胶片上放射性自显影的具体斑点位置,确定和挑选出克隆了目的基因的菌落.
故答案为:
(1)限制酶、DNA连接酶 淀粉
(2)使目的基因能够表达和发挥作用
(3)同位素
根据光学胶片上放射自显影的具体斑点位置,确定和挑选出克隆了目的基因的菌落
(2)启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,是基因的一个组成部分,控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度.终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列.因此目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间,使目的基因能够表达和发挥作用.
(3)根据图乙可以看出,该技术利用DNA分子杂交技术,因此利用PCR技术制备的DNA探针需加入同位素.放射性自显影结果表明,该处DNA探针与目的基因发生的互补配对,因此根据光学胶片上放射性自显影的具体斑点位置,确定和挑选出克隆了目的基因的菌落.
故答案为:
(1)限制酶、DNA连接酶 淀粉
(2)使目的基因能够表达和发挥作用
(3)同位素
根据光学胶片上放射自显影的具体斑点位置,确定和挑选出克隆了目的基因的菌落
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