生物技术实践（1）商品化植酸酶主要来自微生物．在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生，可根据其大

Question

生物技术实践
（1）商品化植酸酶主要来自微生物．在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生______，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性．活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间______表示．
（2）利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图：

Ⅰ中的主要成分为______；Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质．请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据．
（3）为建设基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因．PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：______．反应过程中打开模板DNA双链的方法是______．
（4）除植酸酶外，微生物还应用在______的生产中．

Answer 1

（1）根据选择培养基的原理，在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生透明圈，如果需要进一步测定植酸酶活性，可用一定条件下单位时间表示．酶活性鉴定可以用一定条件下单位时间内底物消耗量或反应生成物量表示．
（2）由菌株制备植酸酶的流程图可知：透析的目的是去除小分子杂质，Ⅰ中透析液的主要成分为小分子杂质．
纯化得到植酸酶的方法，凝胶色谱法：根据蛋白质之间分子大小，吸附性质等差异进行纯化．（或电泳法：根据蛋白质之间电荷，分子大小等差异进行纯化．）
（3）PCR技术是利用DNA双链复制的原理，PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：变性，复性，延伸．反应过程中打开模板DNA双链的方法是加热，使双链打开．
（4）商品化植酸酶主要来自微生物，除植酸酶外，微生物还应用在蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶的生产中．
故答案为：
（1）透明圈     植酸钙的消耗量（肌醇和磷酸的生成量）
（2）小分子杂质
凝胶色谱法：根据蛋白质之间分子大小，吸附性质等差异进行纯化．（或电泳法：根据蛋白质之间电荷，分子大小等差异进行纯化．）
（3）变性、复性和延伸      加热
（4）蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶