早教吧作业答案频道 -->语文-->
梯度PCR疑惑请各位帮帮忙我做梯度升温PCR,从55度到62读的升温,两引物的Tm值相差2度,算的平均值为62度,跑胶后,都跑有目的条带.55度条带最亮,其它亮度较淡且差不多.之后我用55度的退火温度,用
题目详情
梯度PCR疑惑请各位帮帮忙
我做梯度升温PCR,从55度到62读的升温,两引物的Tm值相差2度,算的平均值为62度,跑胶后,都跑有目的条带.55度条带最亮,其它亮度较淡且差不多.之后我用55度的退火温度,用第一次的PCR产物做模板进行PCR,跑胶什么都没有,这是怎么回事啊?难道产物降解了?(第一次产物我存于4度.可是再做第一次产物的跑胶还是有条带啊)或是其它原因?)
我做梯度升温PCR,从55度到62读的升温,两引物的Tm值相差2度,算的平均值为62度,跑胶后,都跑有目的条带.55度条带最亮,其它亮度较淡且差不多.之后我用55度的退火温度,用第一次的PCR产物做模板进行PCR,跑胶什么都没有,这是怎么回事啊?难道产物降解了?(第一次产物我存于4度.可是再做第一次产物的跑胶还是有条带啊)或是其它原因?)
▼优质解答
答案和解析
博凌科为-为你我觉得一种可能是模板量过多,如果55度条带最亮的话你可以把它稀释10-50倍做模板.再就是产物降解,这方面也很有可能,我以前也遇到过相同问题,最后还是换了模板成功的.还有建议你下次批的时候做55和62两个梯度,这样比较保险
看了 梯度PCR疑惑请各位帮帮忙我...的网友还看了以下:
1、在△ABC中,已知b=(√3-1)a,C=30°,求角A与角B的度数2、在△ABC中,c=√6 2020-04-11 …
1.若64^2×8^3=2^x,求x的值.2.已知x^3n=2,求x^6n+x^4n·x^5n的值 2020-04-26 …
求函数y=-x^2+4x+2,(x∈[-1,3])的值域谁给我用图像说一说?我不明白的是明明最大值 2020-05-16 …
4.若圆(x-a)^2+y^2=9与椭圆x^2/9+y^2/4=1有公共点,则实数a的取值范围是( 2020-05-21 …
某无息债券的面值为1000元,期限为2年,发行价为880元,到期按面值偿还该债券的复利到期收益率为 2020-06-07 …
如果用C表示摄氏温度,F表示华氏温度,则C和F之间的关系是:C=5/9(F-32).分别求出当F= 2020-07-15 …
设直线l:3x+4y+a=0,圆C:(x-2)2+y2=2,若在圆C上存在两点P,Q,在直线l上存 2020-07-21 …
已知函数f(x)=|lgx|,0<x≤10−12x+6,x>10,若a,b,c互不相等,且f(a) 2020-07-27 …
如图,某学校九年级(1)班45名同学每周课外阅读时间的频数直方图(每组含前一个边界值,不含后一个边 2020-07-29 …
(1/2)急:向量a、b、c两两成60度角,且a的绝对值为4,b绝对值为2,c绝对值为6.求a.b 2020-07-30 …