（2014•江苏）为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养．请回答下列问题：（1）外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为．（2）在愈

Question

（2014•江苏）为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养． 请回答下列问题：

（1）外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为______．
（2）在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图所示． 细胞干重在12d后下降的原因有______；培养液中蔗糖的作用是______、______．
（3）多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体． 二倍体愈伤组织细胞经______处理，会产生染色体加倍的细胞．为检测愈伤组织细胞染色体数目，压片前常用纤维素酶和______酶解离愈伤组织．若愈伤组织细胞（2n）经诱导处理后，观察到染色体数为8n的细胞，合理的解释是______、______．
（4）为了更好地获得次生代谢产物，生产中采用植物细胞的固定化技术，其原理与酵母细胞固定化类似． 下列说法正确的有______ （填序号）．
①选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋     ②必须在光照条件下培养
③培养过程中需通空气                ④固定化后植物细胞生长会变慢．

Answer 1

（1）外植体经诱导脱分化后形成愈伤组织．
（2）结合图示分析，随细胞干重下降的有蔗糖浓度和pH，蔗糖浓度下降导致愈伤组织营养供应不足，pH降低导致愈伤组织酶活性下降，都会导致细胞干重下降，蔗糖既能提供能源也能调节细胞渗透压．
（3）秋水仙素或低温都可以抑制纺锤体形成，诱导染色体数目加倍，形成多倍体，细胞壁的成分为纤维素和果胶，用纤维素酶和果胶酶处理后再压片更容易分离得到单层细胞，诱导的愈伤组织细胞为2n，经诱导处理后，观察到染色体数为8n 的细胞，可能为经历了两次诱导，加倍到4n 的细胞处于有丝分裂后期，也可能为经历了三次诱导，加倍到8n 的细胞处于有丝分裂中期．
（4）根据题干知，获得植物次生代谢产物，用植物外植体获得愈伤组织再悬浮培养即可，生产中采用植物细胞的固定化技术，应包埋旺盛生长的愈伤组织细胞，①正确，②脱分化过程中光会抑制愈伤组织的形成，②错误，③植物为需氧型生物，培养过程中需通空气，保证其有氧呼吸，缺氧会导致其无氧呼吸产生酒精，对其有毒害作用，③正确，④固定化后植物细胞与细胞悬浮培养相比，物质运输速率降低，生长会变慢，④正确．
故答案为：
（1）脱分化；  
（2）蔗糖浓度下降，pH 降低；  提供能源；  调节渗透压；
（3）秋水仙素（低温）；  果胶；  经加倍到4n 的细胞处于有丝分裂后期；
经加倍到8n 的细胞处于有丝分裂中期；
（4）①③④．