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基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,包括以下几个环节:目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定.回答下列相关问题:(1)在基因
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基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,包括以下几个环节:目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定.回答下列相关问题:
(1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径,即___和从生物材料中分离.如果利用某植物为材料,同时构建cDNA文库和基因组文库,两者相比cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的___(多/少).
(2)在构建基因表达载体时,经常使用质粒载体作为基因工程的工具,其应具备的基本条件有___(答出两点即可).除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子.启动子是___酶识别并结合的部位.这一步骤中通常还会利用到DNA连接酶,常见的有E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是___.
(3)将目的基因导入受体细胞时,如果受体为植物细胞,采用最多的方法是___,如果受体为动物细胞,采用最多的方法是___.
(4)最后,要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,经常采用的检测方法是___.
(1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径,即___和从生物材料中分离.如果利用某植物为材料,同时构建cDNA文库和基因组文库,两者相比cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的___(多/少).
(2)在构建基因表达载体时,经常使用质粒载体作为基因工程的工具,其应具备的基本条件有___(答出两点即可).除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子.启动子是___酶识别并结合的部位.这一步骤中通常还会利用到DNA连接酶,常见的有E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是___.
(3)将目的基因导入受体细胞时,如果受体为植物细胞,采用最多的方法是___,如果受体为动物细胞,采用最多的方法是___.
(4)最后,要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,经常采用的检测方法是___.
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答案和解析
(1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径,即人工合成和从生物材料中分离.cDNA文库和基因文库的比较表:
由此客家,cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少.
(2)作为基因工程的运载体应具备的基本条件有:能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点等.除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子,其中启动子是RNA聚合酶识别并结合的部位.构建基因表达载体时,需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA,DNA连接酶根据来源不同分为E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是T4DNA连接酶.
(3)将目的基因导入植物细胞采用农杆菌转化法,将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法.
(4)最后,要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,经常采用DNA分子杂交技术.
故答案为:
(1)人工合成 少
(2)能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点 RNA聚合 T4DNA连接酶
(3)农杆菌转化法 显微注射技术
(4)DNA分子杂交技术
文库类型 | cDNA | 基因组文库 |
文库大小 | 小 | 大 |
基因中启动子 | 无 | 有 |
基因中内含子 | 无 | 有 |
基因多少 | 某种生物的部分基因 | 某种生物的全部基因 |
物种间的基因交流 | 可以 | 部分基因可以 |
(2)作为基因工程的运载体应具备的基本条件有:能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点等.除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子,其中启动子是RNA聚合酶识别并结合的部位.构建基因表达载体时,需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA,DNA连接酶根据来源不同分为E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是T4DNA连接酶.
(3)将目的基因导入植物细胞采用农杆菌转化法,将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法.
(4)最后,要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,经常采用DNA分子杂交技术.
故答案为:
(1)人工合成 少
(2)能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点 RNA聚合 T4DNA连接酶
(3)农杆菌转化法 显微注射技术
(4)DNA分子杂交技术
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