科学家利用PCR技术分别从抗根结线虫的番茄和辣椒中克降抗性基因SIMi及Ca-Mi，并利用遗传转化方法将它们转入对根结线虫敏感的番茄中，获得抗根结线虫的番茄转基因株系应用于植物抗根结

Question

科学家利用PCR技术分别从抗根结线虫的番茄和辣椒中克降抗性基因SIMi及Ca-Mi，并利用遗传转化方法将它们转入对根结线虫敏感的番茄中，获得抗根结线虫的番茄转基因株系应用于植物抗根结线虫育种．请回答相关问题：
（1）PCR技术是扩增目的基因的常用手段．扩增过程中，目的基因DNA___后解链为单链，___与单链相应互补序列结合，在酶的作用下进行延伸．
（2）___是实施基因工程的核心．
（3）将目的基因转入对根结线虫敏感的番茄中，最常用的方法是___．通过转化，目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内___．
（4）为了检测对根结线虫敏感的番茄中是否插入目的基因，可采用___技术．检测目的基因在分子层面是否表达则可以用___的方法．
（5）为了比较两种抗性基因（SIMi和CaMi）在转基因后的抗根结线虫的效果，可分别取等量的两种成功表达的转基因番茄植株___，比较其抗虫效果．

Answer 1

（1）PCR技术扩增目的基因的过程中，首先进行高温解链，即目的基因DNA受热变性后解链为单链；然后再低温复性，即引物与单链相应互补序列结合；最后中温延伸，即在酶的作用下进行延伸．
（2）基因表达载体的构建是实施基因工程的核心．
（3）将目的基因转入对根结线虫敏感的番茄中，最常用的方法是农杆菌转化法．通过转化，目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达．
（4）分子水平上的检测：为了检测对根结线虫敏感的番茄中是否插入目的基因，可采用DNA分子杂交技术技术．检测目的基因在分子层面是否表达则可以用抗原--抗体杂交的方法．
（5）个体水平上的鉴定：为了比较两种抗性基因（SIMi和CaMi）在转基因后的抗根结线虫的效果，可分别取等量的两种成功表达的转基因番茄植株接种等量根结线虫，比较其抗虫效果．
故答案为：
（1）受热变性       引物
（2）基因表达载体的构建
（3）农杆菌转化法     维持稳定和表达
（4）DNA分子杂交技术    抗原--抗体杂交
（5）接种等量根结线虫