目前认为化疗通过多种途径介导细胞凋亡来杀死癌细胞．顺铂是常用的化疗药物，但癌细胞易产生顺铂耐药；双氢青蒿素也具有抗癌作用．为研究双氢青蒿素对顺铂耐药性的影响及其机制，

Question

目前认为化疗通过多种途径介导细胞凋亡来杀死癌细胞．顺铂是常用的化疗药物，但癌细胞易产生顺铂耐药；双氢青蒿素也具有抗癌作用．为研究双氢青蒿素对顺铂耐药性的影响及其机制，研究者进行了如下实验．

（1）癌细胞不受机体控制，能迅速生长和___．本实验选用患者的耐顺铂肺腺癌细胞，在___培养箱中进行培养，培养液中除抗生素和一般营养物质外还应含有___，此外培养液中加入一定浓度顺铂，目的是___．
（2）将上述培养的细胞分为对照组和实验组．实验组用二甲基亚砜溶解的双氢青蒿素处理，对照组的处理应为___，其它条件相同且适宜．24 小时后均换为含1μg/ml顺铂的细胞培养液，培养36 小时后收集细胞，观察并测定细胞凋亡率，结果如下．
分析以上结果说明___．研究中常用 IC₅₀值表示细胞的耐药程度且二者呈正相关．经检测，IC₅₀值实验组为1.30μg/ml，对照组为5.8μg/ml．
综合分析，实验组细胞凋亡率升高的原因可能有___．
（3）为进一步揭示双氢青蒿素对顺铂耐药性影响的机制，研究者检测了肺腺癌细胞中与凋亡有关的两种蛋白表达量的相对值，结果如下．

	对照组	实验组
抗凋亡蛋白Bcl-2	135.2	93.8
促凋亡蛋白Bax	82.6	114.8

综合上述实验结果，推测双氢青蒿素可能通过___Bcl-2基因表达和___Bax 基因表达，从而逆转顺铁耐药．．

Answer 1

整体实验思路：

（1）考查基础知识，癌细胞具有无限增殖的特点，癌细胞不受机体控制，能迅速生长和无限增殖；动物细胞培养需要在CO₂ 培养箱中培养（CO₂是用来调节培养液的pH值的），同时由于人为配置的培养液中会缺乏一定的细胞因子等物质，所以需要加入动物血清．由于实验的目的是“研究双氢青蒿素对顺铂耐药性的影响及机制”，实验材料就应该是耐顺铂癌细胞，所以在培养液中加入一定浓度顺铂的目的是使增殖得到的癌细胞产生顺铂耐药性．
（2）由于实验组是二甲基亚砜溶解的双氢青蒿素，所以对照组应该用等量的二甲基亚砜处理．从图中可以看出实验组癌细胞的凋亡率明显比对照组高，所以说明双氢青蒿素可以促进耐顺铂癌细胞的凋亡．而从题干中可以看出实验组的耐药程度明显降低，所以，实验组细胞凋亡率提高的原因可能是双氢青蒿素减弱了肺腺癌细胞的顺铂耐药程度，进而使细胞凋亡率提高．
（3）从表格中可以看出实验组的抗凋亡蛋白Bcl-2 含量明显比对照组降低，而促凋亡蛋白Bax 含量明显比对照组增加．所以推测双氢青蒿素可能通过抑制Bcl-2 基因表达和促进Bax 基因表达，从而逆转顺铂耐药．
故答案为：
（1）无限增殖    CO₂  动物血清   保持所培养的细胞均有顺铂耐药性
（2）等量的   二甲基亚砜双氢青蒿素可以促进耐顺铂肺腺癌细胞的凋亡    双氢青蒿素直接诱导癌细胞凋亡或双氢青蒿素减弱了肺腺癌细胞对顺铂的耐药性而被顺铂诱导凋亡
（3）抑制   促进