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人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:(1
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人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有___.
(2)将经融合处理后的细胞转到HAT接着基上培养的目的是___,该细胞___(填“能”“不能”)产生专一性抗体,所产生的抗体___(填“一定”,“不一定”)能抗HPV.
(3)对于抗体检测呈___性的杂交克隆应进行克隆化培养,克隆化培养的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/mL,每孔加入细胞稀释液___mL(填“0.1”“1”或“10”),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的.
(4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路.除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路___.
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有___.
(2)将经融合处理后的细胞转到HAT接着基上培养的目的是___,该细胞___(填“能”“不能”)产生专一性抗体,所产生的抗体___(填“一定”,“不一定”)能抗HPV.
(3)对于抗体检测呈___性的杂交克隆应进行克隆化培养,克隆化培养的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/mL,每孔加入细胞稀释液___mL(填“0.1”“1”或“10”),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的.
(4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路.除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路___.
▼优质解答
答案和解析
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合.
(2)看图分析可知:小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上生长,但是没有说能不能生存,只是不能增殖,正常细胞也能在HAT培养基上存活,故①无抗体分泌的细胞、②抗HPV抗体的分泌细胞、③其它无关抗体的分泌细胞都能在HAT培养基上存活,但是能够增重的只有杂交瘤细胞.将经融合处理后的细胞转到HAT接着基上培养的目的是筛选出杂交瘤细胞,该细胞能产生专一性抗体,所产生的抗体不一定能抗HPV.
(3)对于抗体检测呈阳性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个细胞/mL,每孔加入细胞稀释液0.1mL,使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的.
(4)由于调控细胞无限增殖的prG基因位于细胞质中,因此若要采用细胞核移植获得单克隆抗体时,只能讲浆细胞的细胞核移入到含有prG基因的细胞质中,获得重组细胞,最终获得单克隆抗体.
故答案为:
(1)动物细胞培养、动物细胞融合
(2)筛选出杂交瘤细胞 能 不一定
(3)阳 0.1
(4)通过基因工程向浆细胞中导入prG;
利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中
(2)看图分析可知:小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上生长,但是没有说能不能生存,只是不能增殖,正常细胞也能在HAT培养基上存活,故①无抗体分泌的细胞、②抗HPV抗体的分泌细胞、③其它无关抗体的分泌细胞都能在HAT培养基上存活,但是能够增重的只有杂交瘤细胞.将经融合处理后的细胞转到HAT接着基上培养的目的是筛选出杂交瘤细胞,该细胞能产生专一性抗体,所产生的抗体不一定能抗HPV.
(3)对于抗体检测呈阳性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个细胞/mL,每孔加入细胞稀释液0.1mL,使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的.
(4)由于调控细胞无限增殖的prG基因位于细胞质中,因此若要采用细胞核移植获得单克隆抗体时,只能讲浆细胞的细胞核移入到含有prG基因的细胞质中,获得重组细胞,最终获得单克隆抗体.
故答案为:
(1)动物细胞培养、动物细胞融合
(2)筛选出杂交瘤细胞 能 不一定
(3)阳 0.1
(4)通过基因工程向浆细胞中导入prG;
利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中
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