研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究，肺部细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现

Question

研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究，肺部细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图所示，据图回答。

 

1）.在基因工程中通常选择细菌质粒作为载体，原因是                           ；如果某质粒由100 0个脱氧核苷酸组成，脱氧核苷酸平均分子量为a 则该质粒的质量为         。

2）.图甲中在构建重组载体时，酶切目的基因和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端必须是                 。

3）.图甲中在将酶切后的目的基因导入到酶切后的质粒上时需要的酶是               ， 图乙中let-7基因转录过程需要的酶是     ，这 两种酶作用的化学键都是           。

4）.原代培养是是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。原代培养随着培养时间的延长和细胞不断分裂，空间因素和营养因素会限制其进一步生长。此时就需要将培养物分割成小的部分（组织细胞分散开），重新接种到另外的培养器皿内再进行培养，这个过程就称为传代或者再培养。图甲中进行传代培养操作时，需要用 　　 　　 酶处理贴附在原代培养培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

5）.研究发现，let-7基因能影响RAS基因的表达，其影响机理如图乙所示。从分子水平的角度分析，其作用机理是 　　                                　     　 。

 

Answer 1

1）.质粒进入受体细胞（宿主细胞）能稳妥保存并复制自己（有多个酶切位点，有标记基因）1000a—18000

2）.互补

3）.DNA连接酶   RNA聚合酶    磷酸二酯键

4）.（胰）蛋白酶

5）.let-7转录的无翻译功能的miRNA能与RAS mRNA特异性结合，抑制RAS蛋白质的合成

分 析：
（1）治理作为运载体的原因：具有标记基因和多个酶切位点、能自我复制；质粒为环状DNA分子，由1000个脱氧核苷酸组成，脱去的水分子数是1000，则该质粒的质量是1000a-18000；（3）需要DNA连接酶连接断裂的磷酸二酯键，转录需要的酶是RNA聚合酶也作用于磷酸二酯键；（5）let-7基因转录的miRNA，与RAS基因转录的mRNA配对，使其无法翻译，抑制蛋白质的合成。

考点：
本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题。