烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物．临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验．实验

Question

烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物．临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验．实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性．
（1）获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有___、___、___和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50℃时，在___附近倒平板．经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落．
（2）检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用___法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板．将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素___；含头抱菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明___；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是___，二是___．
（3）根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素___．

Answer 1

（1）获取绿脓杆菌单菌落：培养基的成分一般都含有碳源、氮源、水和无机盐；倒平板时为了防止杂菌污染应该在酒精灯火焰附近倒平板．
（2）检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用稀释涂布平板法种于固体培养基表面；将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头抱菌素和碳青霉烯类抗生素的同大小的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，如果含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，说明绿脓杆菌对比阿培南、美罗培南、头抱菌素和碳青霉烯类抗生素都敏感；如果含头抱菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，则说明绿脓杆菌对头孢菌素面敏感性比对美罗培南弱；如果比阿培南透明圈中出现了一个菌落，可能的原因是杂菌污染，或者是绿脓杆菌产生耐药性突变个体形成的菌落．
（3）分析（2）中 的实验结果可知，该病人体内的绿脓杆菌对美罗培南最敏感，是该病人首选的抗生素．
故答案为：
（1）碳源 氮源    水  酒精灯火焰
（2）稀释涂布平板法 敏感 绿脓杆菌对头孢菌素面敏感性比对美罗培南弱 杂菌污染 抗比阿培南的绿脓杆菌形成的菌落（绿脓杆菌产生耐药性突变形成菌落）
（3）美罗培南