青光眼是导致人类失明的三大致盲眼病之一，其中发育性青光眼（婴幼儿型和青少年型）具有明显的家族遗传倾向，如图是某家系发育型青光眼的系谱图．（1）发育型青光眼是单基因显性遗

Question

青光眼是导致人类失明的三大致盲眼病之一，其中发育性青光眼（婴幼儿型和青少年型）具有明显的家族遗传倾向，如图是某家系发育型青光眼的系谱图．

（1）发育型青光眼是单基因显性遗传病，根据如图系谱推断，致病基因应位于___染色体上，其遗传时遵循___定律．
检查发现，发育型青光眼患者角膜小梁细胞中M蛋白异常．为研究其病因，研究者用含荧光蛋白基因的质粒与M蛋白基因构建基因表达载体，分别导入Hela细胞中进行培养，一段时间后检测培养液和细胞中荧光的分布情况，实验分组及检测结果如表：
（G：绿色荧光蛋白基因；R：红色荧光蛋白基因；M⁺：正常人M蛋白基因；M^-：青光眼患者M蛋白基因；两基因表达的产物是一个整体）

		1组	2组	3组	4组	5组	6组
导入Hela细胞的质粒（局部）							和
荧光检测	细胞内	有红色荧光	有绿色荧光	有红色荧光	有绿色荧光	有红色荧光	有红色荧光和绿色荧光
	培养液	无荧光	无荧光	有红色荧光	有绿色荧光	无荧光	无荧光

（2）构建基因表达载体时必需的工具酶是___．
a．解旋酶  b．DNA连接酶  c．Taq酶  d．限制酶  e．逆转录酶
（3）根据如表推测，发育型青光眼的病因是M蛋白___（“能”或“不能”）正常分泌到细胞外，最终导致小梁细胞功能异常．
（4）如表中第___组实验可以为“发育型青光眼是显性遗传病”这一结论提供重要证据．
（5）为进一步研究M蛋白出现异常的原因，研究者提取了M^-基因进行测序，然后与M⁺基因进行比对，其结果如下：

分析可知，患发育型青光眼的根本原因是基因中的碱基对由___变成了___．

Answer 1

（1）系谱分析表明，发育型青光眼最可能是单基因显性遗传病．Ⅰ₁患病，而Ⅱ₄不患病，则该病一定不是伴X染色体显性遗传病；Ⅱ₃患病，而Ⅲ₃不患病，则该病一定不是伴X染色体隐性遗传病，因此该病只能是常染色体遗传病，其遗传时遵循基因的分离定律．
（2）构建基因表达载体时必需的工具酶为限制酶和DNA连接酶．
（3）根据1和2组实验结果可知，在没有M蛋白的情况下，荧光标记只存在于细胞内，而和正常M蛋白基因连接后，荧光标记出现在了培养液中，即正常M蛋白合成后会分泌到细胞外，但是和青光眼患者M蛋白基因连接后，细胞外将不会出现荧光标记，由此可见，发育型青光眼的病因是M蛋白基因异常导致其指导合成的M蛋白异常，导致小梁细胞中的M蛋白不能正常地分泌到细胞外而在细胞中大量积累，最终导致小梁细胞功能异常．
（4）由（3）题的分析可知，表中第4组、5组、6组组实验可以为“发育型青光眼是显性遗传病”这一结论提供重要证据．
（5）分析图2可知，患发育型青光眼的根本原因是基因中的碱基对由C∥G变成了T∥A，最终导致M蛋白的结构发生了改变．
故答案为：
（1）常             基因的分离
（2）b和d
（3）不能
（4）4组、5组、6组
（5）C∥G      T∥A