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EPO是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称,是一种激素样物质,可促进体内新红细胞生成.人类已可通过基因工程合成EPO基因,并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物.
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EPO是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称,是一种激素样物质,可促进体内新红细胞生成.人类已可通过基因工程合成EPO基因,并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物.其过程如下:
请回答下列问题:
(1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到___,再通过PCR技术获得大量EPO基因.
(2)供体母鼠通常情况下每次排卵8~12枚,为使其超数排卵,需注射___激素以排出更多的卵子,培养到___时期与获能的精子相遇时,精子首先发生___反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精.
(3)①过程构成了基因表达载体,内部包括不可缺少的组成部分,其中___能驱动基因的转录.
(4)采用___技术,将重组表达载体导入小鼠受精卵中,将受精卵移入发育培养液中继续培养.培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加___、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清(血浆)等物质.
(5)当胚胎发育至___时期,向受体移植,为获得更多个转基因胚胎,要将___均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行___.
(6)若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO,可以采用___技术对血液来进行检测.
请回答下列问题:
(1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到___,再通过PCR技术获得大量EPO基因.
(2)供体母鼠通常情况下每次排卵8~12枚,为使其超数排卵,需注射___激素以排出更多的卵子,培养到___时期与获能的精子相遇时,精子首先发生___反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精.
(3)①过程构成了基因表达载体,内部包括不可缺少的组成部分,其中___能驱动基因的转录.
(4)采用___技术,将重组表达载体导入小鼠受精卵中,将受精卵移入发育培养液中继续培养.培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加___、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清(血浆)等物质.
(5)当胚胎发育至___时期,向受体移植,为获得更多个转基因胚胎,要将___均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行___.
(6)若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO,可以采用___技术对血液来进行检测.
▼优质解答
答案和解析
(1)获取目的基因的方法可通过反转录法,故从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到cDNA,再通过PCR技术获得大量EPO基因.
(2)为使供体母鼠超数排卵,需注射促性腺激素以排出更多的卵子,卵子需培养到减数第二次分裂中期时才能与获能的精子相遇时,精子首先发生顶体反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精.
(3)①过程为形成基因表达载体的过程,基因表达载体包括启动子、终止子等,其中启动子为RNA聚合酶结合的部位,能驱动基因的转录.
(4)将重组表达载体导入动物细胞中常采用显微注射技术技术.动物细胞培养的培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清(血浆)等物质.
(5)胚胎移植时一般在桑椹胚或囊胚时期,为获得更多转基因胚胎,要将囊胚的内细胞团均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定.
(6)检测蛋白质的是否合成可通过抗原抗体杂交法,故若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO,可以采用抗原抗体杂交技术对血液来进行检测.
故答案为:
(1)cDNA
(2)促性腺 减数第二次分裂中期 顶体
(3)启动子
(4)显微注射技术 维生素
(5)桑椹胚或囊胚 内细胞团 性别鉴定
(6)抗原抗体杂交
(2)为使供体母鼠超数排卵,需注射促性腺激素以排出更多的卵子,卵子需培养到减数第二次分裂中期时才能与获能的精子相遇时,精子首先发生顶体反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精.
(3)①过程为形成基因表达载体的过程,基因表达载体包括启动子、终止子等,其中启动子为RNA聚合酶结合的部位,能驱动基因的转录.
(4)将重组表达载体导入动物细胞中常采用显微注射技术技术.动物细胞培养的培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清(血浆)等物质.
(5)胚胎移植时一般在桑椹胚或囊胚时期,为获得更多转基因胚胎,要将囊胚的内细胞团均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定.
(6)检测蛋白质的是否合成可通过抗原抗体杂交法,故若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO,可以采用抗原抗体杂交技术对血液来进行检测.
故答案为:
(1)cDNA
(2)促性腺 减数第二次分裂中期 顶体
(3)启动子
(4)显微注射技术 维生素
(5)桑椹胚或囊胚 内细胞团 性别鉴定
(6)抗原抗体杂交
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