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克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞的异常凋亡有关.Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系.克隆猪的培育及
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克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞的异常凋亡有关.Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系.克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图所示.
(1)图中卵母细胞除可从活体输卵管中采集外.还可以从已宰杀的母羊______中获取;成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行去核处理,同时用微型吸管吸走______.
(2)在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数,进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数,从而反映出Bcl-2基因的转录水平.
①图中X表示______过程.
②从基因组数据库中查询Bcl-2mRNA的核苷酸序列,以便根据这一序列设计合成两种引物用于PCR扩增,PCR过程第一轮循环的模板是______,该过程所需要的酶是______.
(1)图中卵母细胞除可从活体输卵管中采集外.还可以从已宰杀的母羊______中获取;成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行去核处理,同时用微型吸管吸走______.
(2)在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数,进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数,从而反映出Bcl-2基因的转录水平.
①图中X表示______过程.
②从基因组数据库中查询Bcl-2mRNA的核苷酸序列,以便根据这一序列设计合成两种引物用于PCR扩增,PCR过程第一轮循环的模板是______,该过程所需要的酶是______.
▼优质解答
答案和解析
(1)卵母细胞的来源可以是输卵管也可以是母羊的卵巢;卵母细胞在去核处理的时候要用吸管吸走第一极体;
(2)X指有RNA生成DNA,表示逆转录;PCR扩增技术中反体系中应需要引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、缓冲液、脱氧核苷酸、水等,扩增第一轮循环的模板是Bcl-2 cDNA,需要的酶是cDNA热稳定DNA聚合酶.
故答案为:
(1)卵巢 第一极体
(2)①反转录 ②Bcl-2 cDNA热稳定DNA聚合酶
(2)X指有RNA生成DNA,表示逆转录;PCR扩增技术中反体系中应需要引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、缓冲液、脱氧核苷酸、水等,扩增第一轮循环的模板是Bcl-2 cDNA,需要的酶是cDNA热稳定DNA聚合酶.
故答案为:
(1)卵巢 第一极体
(2)①反转录 ②Bcl-2 cDNA热稳定DNA聚合酶
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