某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因．利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题：（1）从基因文库中

Question

某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因．利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题：
（1）从基因文库中获得的抗盐基因可用___技术进行扩增．将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状的产生所依据的原理___．
（2）如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能___，也不能___．
（3）在构建重组质粒时，应选用___两种酶对___进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性．
（4）为了确定抗盐烟草培育成功，既要用放射性同位素标记的___作探针进行分子杂交检测，又要用___的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性．

Answer 1

（1）从基因文库中获得的目的基因可用PCR技术进行扩增．将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状的产生所依据的原理是基因重组．
（2）如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，培育出的烟草植株不具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制和转录，所以需要构建基因表达载体．
（3）只要SalⅠ酶切割含有目的基因的DNA与质粒，形成相同的黏性末端，容易发生自身连接和反向接入；HindⅢ会破坏目的基因；则在构建重组质粒时，应选用SalⅠ、HindⅢ两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性．
（4）探针是指用放射性同位素标记的目的基因（抗盐基因）．除了从分子水平上进行检测，还可以从个体水平上进行鉴定，即用一定浓度的盐水浇灌烟草植株来鉴定烟草的耐盐性．
故答案为：
（1）PCR 基因重组
（2）复制  转录
（2）SalⅠ和HindⅢ质粒和含抗盐基因的DNA
（3）终止子 RNA聚合酶识别和结合的位点并驱动基因转录出mRNA 鉴定受体细胞中是否含有目的基因并筛选出含目的基因的受体细胞
（4）抗盐基因   抗原-抗体杂交