细胞提取总RNA检测RIN太低是什么原因?有什么方法解决?

Question

细胞提取总RNA检测RIN太低是什么原因?有什么方法解决?

Answer 1

RIN(RNA Integrity Number):RNA完整性计数,看你的RNA是不是完整,质量好不好,太低就说明降解严重~~~
其实提取RNA的条件没那么苛刻,在普通的通风橱里就可以操作,外源RNase的污染比较好消除,关键是破壁时的内源降解.如果用trizol法就必须考虑trizol的量.
另外,相同的方法提取不同细菌的RNA效果也不一样.比如霍乱用trizol法提取效果极差,而沙门菌提取效果就较好；所以霍乱菌最好是用试剂盒过柱子提取,然后浓缩.我提取的是大肠杆菌,摸索了好几种方法,最后确定也是qiagen 的kit提取,然后浓缩.
另外,有一种可以喷的液体,叫做RNase抑制剂,用于消除表面RNase的污染,在客观条件不是很好的时候很有效.
最后祝lz实验顺利,好运啊!