无菌培养体系的建立方法（植物生物技术）,请给出简单具体的步骤,

Question

无菌培养体系的建立方法（植物生物技术）,请给出简单具体的步骤,

Answer 1

番木瓜组织培养无菌体系的建立 番木瓜株性复杂、遗传高度杂合,用常规种子繁殖很难保持株性一致,同时,番木瓜环斑病毒病使其由多年生变为一年生,大大限制了番木瓜的生产和利用.通过组织培养进行无性系快速繁殖可以解决,在种苗商业化生产中已进入应用阶段.1材料与方法1.1外植体的选择、获取与预处理从田间成年健壮番木瓜植株上剪取生长有顶芽和侧芽的旺盛分枝,切除多余枝条部分,去掉叶片、叶柄,放入保鲜袋.1.2外植体的消毒方法的确定1.2.1方法Ⅰ自来水冲洗10min→饱和肥皂水浸泡20min→无菌水冲洗3次→75%酒精30s→无菌水冲洗2次→4%次氯酸钠12min→无菌水冲洗4次→消毒的滤纸上吸干水分→接种到不含山农一号溶液的培养基中.1.2.2方法Ⅱ自来水冲洗10min→饱和肥皂水20min→无菌水冲洗3次→75%酒精30s→无菌水冲洗2次→0.1%升汞10min→4%次氯酸钠8min→无菌水冲洗4次→消毒的滤纸上吸干水分→接种到不含山农一号溶液的培养基中.1.2.3方法Ⅲ自来水冲洗10min→饱和肥皂水20min→无菌水冲洗3次→75%酒精30s→无菌水冲洗2次→0.1%升汞10min→无菌水冲洗.
濮云飞