在生物的生长发育过程中，基因是选择性表达的．某真核生物，要想获得极为稀少的mRNA及其克隆，可以用如图所示的差异杂交法．Poly（A）是指位于mRNA上的150-200个腺苷酸残基．请回答下列

Question

在生物的生长发育过程中，基因是选择性表达的．某真核生物，要想获得极为稀少的mRNA及其克隆，可以用如图所示的差异杂交法．Poly（A）是指位于mRNA上的150-200个腺苷酸残基．请回答下列问题．
（1）利用表达目的mRNA的细胞获得放射性标志的探针时，需要用___酶，可以用___作为引物．
（2）用羟基磷灰石柱层析法，回收___（填“未杂交的³²P标记的单链DNA”或“杂交分子”），用构建___（填“基因组”或“cDNA”）文库．
（3）在生物的生长发育过程中．由于基因选择性表达导致细胞___，该过程的结果使多细胞生物体中的细胞趋向___，有利于提高各种生理功能的效率．
（4）若用NaOH水解除去mRNA获得的分子与不表达目的mRNA细胞中获得的单链DNA杂交，可能形成杂合双链区和游离的单链区，原因是___．

Answer 1

（1）分析图解可知，利用表达目的mRNA的细胞获得放射性标志的探针的过程就是逆转录过程，因此需要用逆转录酶，用Poly（A）作为引物．
（2）根据题意可知“要想获得极为稀少的mRNA及其克隆”，因此用羟基磷灰石柱层析法，回收未杂交的³²P标记的单链DNA，由于该DNA是利用mRNA逆转录而来，不包含这种生物的全部基因，因此构建的是cDNA文库．
（3）在生物的生长发育过程中，由于基因选择性表达导致细胞分化，该过程的结果使多细胞生物体中的细胞趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率．
（4）DNA分子中含有内含子、非编码区等序列，mRNA分子中没有互补的碱基序列，仍然为两条游离的单链，所以出现游离单链区．DNA分子中含有外显子序列，mRNA中具有互补的碱基序列，互补碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区，因此用NaOH水解除去mRNA获得的分子与不表达目的mRNA细胞中获得的单链DNA杂交，可能形成杂合双链区和游离的单链区．
故答案为：
（1）逆转录酶    Poly （A）    
（2）未杂交的³²P标记的单链DNA     cDNA
（3）分化    专门化
（4）DNA分子中含有内含子、非编码区等序列，mRNA分子中没有互补的碱基序列，仍然为两条游离的单链，所以出现游离单链区．DNA分子中含有外显子序列，mRNA中具有互补的碱基序列，互补碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区