某校实验小组对某种品牌的酸奶中乳酸菌的数量进行了测定．取6支灭菌的试管，分别加入9mL灭菌的生理盐水，标号为B1、B2、B3、B4、B5、B6；吸取1mL酸奶样液加入试管B1中，混合均匀；然后另

Question

某校实验小组对某种品牌的酸奶中乳酸菌的数量进行了测定．取6支灭菌的试管，分别加入9mL灭菌的生理盐水，标号为B₁、B₂、B₃、B₄、B₅、B₆；吸取1mL酸奶样液加入试管B₁中，混合均匀；然后另取一支吸管从B₁中吸取1mL溶液，加入B₂中，依此类推，最后从试管B₆中取0.1mL样液进行涂布计数，涂布三个平板，其菌落数分别为251、265、276个．
请回答下列问题：
（1）培养乳酸菌除了必要的___外，还需在培养基中添加维生素．
（2）制备乳酸菌的培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是___；待平板冷凝后，要将平板倒置，其目的是___．
（3）该实验小组对乳酸菌接种所采用的方法是___．根据酸奶样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___；根据三个平板中菌落数，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为___个/mL，该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比，一般___（填“偏大”或“偏小”）．
（4）为了使测量结果更加准确，该实验对照组的设置是___．

Answer 1

（1）乳酸菌为细菌，配制该培养基的化学成分包括碳源、氮源、水、无机盐四类营养成分，在培养该细菌的培养基中还需要添加维生素．
（2）制备培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是干热灭菌法．待平板冷凝后，要将平板倒置，其目的是防止平板冷凝后，培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染．
（3）取6支灭菌的试管，分别加入9mL灭菌的生理盐水，标号A₁、A₂、A₃、A₄、A₅、A₆，吸取1mL酸奶样液中加入试管A₁中，然后另取一支吸管从A₂中吸取1mL溶液，加入A₂中，依此类推，最后从试管A₆中取0.1mL样液进行涂布计数，这种接种方法是稀释涂布法．根据操作步骤可推知得到10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶倍的稀释液．从试管A₆中取0.1mL样液进行涂布计数，三个平板中菌落数分别为251、265、276个，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为(251+265+276)/(3)×10×106=2.64×10⁹个/mL．稀释涂布平板法测定活菌数目时，由于相邻的细菌可能形成一个菌落，因此测定值可能比实际值小．
（4）为了使测量结果更加准确，需要另增设一组培养基，接种等量灭菌的生理盐水．
故答案为：
（1）营养物质
（2）干热灭菌法      防止平板冷凝后，培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染
（3）稀释涂布平板法     菌落数目     2.64×10⁹    偏小
（4）另增设一组培养基，接种等量灭菌的无菌水，其他操作均相同