2.(2012·浙江自选)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下
2 . (2012· 浙江自选 ) 幽门螺杆菌 (Hp) 感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:
配制培养基 →灭菌、倒平板 →X →培养 →观察
请回答:
(1) 在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为 Hp 含有 ________ ,它能以尿素作为氮源;若有 Hp ,则菌落周围会出现 ________ 色环带。
(2) 下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 ________ 灭菌。
A .高压蒸汽 B .紫外灯照射
C . 70% 酒精浸泡 D .过滤
(3) 步骤 X 表示 ________ 。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液 ________ 到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得 ________ 菌落。
(4) 在培养时,需将培养皿倒置并放在 ________ 中。若不倒置培养,将导致 ________ 。
(5) 临床上用 14 C 呼气试验检测人体是否感染 Hp ,其基本原理是 Hp 能将 14 C 标记的 ________ 分解为 NH 3 和 14 CO 2 。
答案: (1) 脲酶 红
(2)D
(3) 接种 涂布 单一
(4) 恒温培养箱 无法形成单一菌落
(5) 尿素
解析: 本题考查分离以尿素为氮源的微生物的过程 , 以操作步骤为主线 , 考查考生对基础知识的识记与应用能力 , 题目难度较小。 (1) 幽门螺杆菌含有脲酶 ,
能分解尿素为菌体提供氮源 , 因此在配制培养基时要加入尿素;加入酚红指示剂的目的是检验是否有 Hp 存在 , 若有 Hp 存在会分解尿素 , 培养基 pH 会升高 , 酚红指示剂将变红。 (2) 由于尿素在高温下会分解 , 所以对尿素溶液的灭菌要采用 G6 玻璃漏斗过滤的方法。 (3) 在实验操作过程中要先灭菌、倒平板 , 再进行接种。接种时先将菌液稀释 , 以获得单一菌落 , 再涂布到培养基平面上。 (4) 培养时需将培养皿倒置并放在恒温箱中培养 , 倒置培养的目的也是为了获得单一菌落。 (5) 如果人体感染了 Hp , 能将尿素分解为 NH 3 和 CO 2 , 因而标记尿素中的 C , 可通过呼吸产物来判断是否感染 Hp 。
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