骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一．科研人员研究曲古抑菌A（TSA）对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制，为临床治疗寻找新方向．实验过程如下：步骤1用含青霉素和链霉素的高糖培

Question

骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一．科研人员研究曲古抑菌A（TSA）对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制，为临床治疗寻找新方向．实验过程如下：
步骤1  用含青霉素和链霉素的高糖培养基，在37℃、5% CO₂培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间．
步骤2  取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞，用加入不同浓度的TSA（0～200ng•mL^-1）的培养基继续培养24h．
步骤3  对各组细胞进行抽样检测，检测方法是先用台盼蓝试剂（一种细胞活性染料）染色再用血细胞计数板计数，统计细胞存活率（未染色细胞数/细胞总数×100%），结果如图1．
步骤4  分别提取TSA浓度为0ng•mL^-1、25ng•mL^-1、50ng•mL^-1处理的3组细胞，测量细胞中与凋亡相关的基因（Bax、Bcl-2）和β-肌动蛋白基因（不同的组织细胞中表达相对恒定）表达的蛋白质量并计算比值，结果如图2．

分析回答：
（1）与正常成骨细胞相比，骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移，其主要原因是___．高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是___，细胞培养箱中保持5% CO₂的作用是___．
（2）步骤2中，设置0ng•mL^-1 TSA实验的主要目的是___．
（3）用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是___．
（4）图1所示结果表明___．
（5）根据图2判断，骨肉瘤细胞中___基因过度表达会加速细胞凋亡．

Answer 1

（1）与正常成骨细胞相比，骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移，其主要原因是骨肉瘤细胞膜上的糖蛋白等物质减少．高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是防止杂菌污染．细胞培养箱中保持5% CO₂的作用是维持培养液pH．
（2）生物学实验中通常要设置对照实验，其中空白对照实验的作用是排除非测量因素（实验自变量以外的影响实验结果的因素）对实验结果的影响．
（3）用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是活细胞的细胞膜具有选择透过性，台盼蓝不能进入活细胞内．
（4）根据图1显示实验结果是随着处理的TSA浓度增加骨肉瘤细胞的存活率下降，说明TSA浓度增加对骨肉瘤细胞凋亡的促进作用增强，注意实验结果说明（结论）不等于实验结果．
（5）图2实验结果显示，TSA浓度越高Bcl-2表达蛋白质越少，而Bax表达蛋白质越多，说明前者蛋白质是抑制细胞凋亡而后者旺盛表达促进细胞凋亡．
故答案为：
（1）骨肉瘤细胞膜上的糖蛋白等物质减少    防止杂菌污染    维持培养液pH
（2）排除非测试因素对实验结果的影响
（3）活细胞的细胞膜具有选择透过性，台盼蓝不能进入活细胞内（死细胞膜失去选择透过性，台盼蓝能进入死细胞内）
（4）TSA浓度越高对骨肉瘤细胞凋亡的促进作用越强
（5）Bax