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为获得果胶酶高产菌株,科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作.(1)为分离果胶酶产生菌,科研人员配制了下表所示成分的培养基,该表空白处的两种成分是.制备的培养基常用
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为获得果胶酶高产菌株,科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作.
(1)为分离果胶酶产生菌,科研人员配制了下表所示成分的培养基,该表空白处的两种成分是___.制备的培养基常用___法进行灭菌.
(2)科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中,震荡混匀,制成悬液.为获得较均匀分布的单菌落,还需要将悬液进行___,用___法接种于固体培养基上.接种后的培养基___状态放人培养箱.
(3)选择单菌落数目适宜的培养基,加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色),一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液,观察并比较菌落___直径的比值,筛选果胶酶高产菌株.
(4)将获得的菌株进行液体培养后,从培养液的___(填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶.将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合,一定时间后测定吸光值来测定酶活性.进行吸光值测定时,需将___与等量果胶溶液混合,作为实验的对照.
(1)为分离果胶酶产生菌,科研人员配制了下表所示成分的培养基,该表空白处的两种成分是___.制备的培养基常用___法进行灭菌.
K2HPO4 | MgSO4 | NaNO3 | FeSO4 | 琼脂 | ||
0.1g | 0.5g | 3g | 0.01g | 2g | 15g | 加至1L |
(3)选择单菌落数目适宜的培养基,加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色),一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液,观察并比较菌落___直径的比值,筛选果胶酶高产菌株.
(4)将获得的菌株进行液体培养后,从培养液的___(填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶.将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合,一定时间后测定吸光值来测定酶活性.进行吸光值测定时,需将___与等量果胶溶液混合,作为实验的对照.
▼优质解答
答案和解析
(1)由于实验目的是分离果胶酶产生菌,所以培养基中需要加入果胶,在配制过程中,需要用蒸馏水先配制成液体培养基,再凝固成固体培养基.制备的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌.
(2)为获得较均匀分布的单菌落,还需要将悬液进行梯度稀释,并用稀释涂布法接种于固体培养基上.接种后的培养基倒置状态放入培养箱,防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染.
(3)选择单菌落数目适宜的培养基,加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色),一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液,观察并比较菌落和水解直径的比值,筛选果胶酶高产菌株.
(4)将获得的菌株进行液体培养后,从培养液的上清液获得粗提的果胶酶.将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合,一定时间后测定吸光值来测定酶活性.进行吸光值测定时,需将等量失活的粗提果胶酶与等量果胶溶液混合,作为实验的对照.
故答案为:
(1)果胶和蒸馏水 高压蒸汽灭菌
(2)梯度稀释 稀释涂布 倒置
(3)水解(或“透明”)
(4)上清液 等量失活的粗提果胶酶
(2)为获得较均匀分布的单菌落,还需要将悬液进行梯度稀释,并用稀释涂布法接种于固体培养基上.接种后的培养基倒置状态放入培养箱,防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染.
(3)选择单菌落数目适宜的培养基,加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色),一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液,观察并比较菌落和水解直径的比值,筛选果胶酶高产菌株.
(4)将获得的菌株进行液体培养后,从培养液的上清液获得粗提的果胶酶.将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合,一定时间后测定吸光值来测定酶活性.进行吸光值测定时,需将等量失活的粗提果胶酶与等量果胶溶液混合,作为实验的对照.
故答案为:
(1)果胶和蒸馏水 高压蒸汽灭菌
(2)梯度稀释 稀释涂布 倒置
(3)水解(或“透明”)
(4)上清液 等量失活的粗提果胶酶
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