EPO是促红细胞生成素（Erythropoietin）的英文简称，是一种激素样物质，可促进体内新红细胞生成．人类已可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达系统来获取产物．

Question

EPO是促红细胞生成素（Erythropoietin）的英文简称，是一种激素样物质，可促进体内新红细胞生成．人类已可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达系统来获取产物．其过程如下：

请回答下列问题：
（1）从人体组织中提取EPO的mRNA，通过逆转录得到___，再通过PCR技术获得大量EPO基因．
（2）供体母鼠通常情况下每次排卵8～12枚，为使其超数排卵，需注射___激素 以排出更多的卵子，培养到___时期与获能的精子相遇时，精子首先发生___反应，穿越放射冠和透明带，完成体外受精．
（3）①过程构成了基因表达载体，内部包括不可缺少的组成部分，其中___能驱动基因的转录．
（4）采用___技术，将重组表达载体导入小鼠受精卵中，将受精卵移入发育培养液中继续培养．培养液成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及___等物质．
（5）当胚胎发育至___时期，向受体移植，为获得更多个转基因胚胎，要将___均等切割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．此外，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行___．

Answer 1

（1）获取目的基因的方法可通过反转录法，故从人体组织中提取EPO的mRNA，通过逆转录得到cDNA，再通过PCR技术获得大量EPO基因．
（2）为使供体母鼠超数排卵，需注射促性腺激素以排出更多的卵子，卵子需培养到减数第二次分裂中期时才能与获能的精子相遇时，精子首先发生顶体反应，穿越放射冠和透明带，完成体外受精．
（3）①过程为形成基因表达载体的过程，基因表达载体包括启动子、终止子等，其中启动子为RNA聚合酶结合的部位，能驱动基因的转录．
（4）将重组表达载体导入动物细胞中常采用显微注射技术技术．动物细胞培养的培养液成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清（血浆）等物质．
（5）胚胎移植时一般在桑椹胚或囊胚时期，为获得更多转基因胚胎，要将囊胚的内细胞团均等切割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．此外，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定．
故答案为：
（1）cDNA
（2）促性腺        减数第二次         顶体
（3）启动子
（4）显微注射       血清
（5）桑椹胚或囊胚     内细胞团       性别鉴定