（2013•徐州模拟）荧光素酶（Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称．荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的利用．（1）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因

Question

（2013•徐州模拟）荧光素酶（Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称．荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的利用．
（1）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，一个完整的基因表达载体除了目的基因、标记基因和复制原点外，还应包括______．
（2）下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，图1为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点．若需利用酶切法获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是______．

限制酶	MspⅠ	BamHⅠ	MboⅠ	SmaⅠ
酶切 位点	C↓CGG GGC↑C	G↓GATCC CCTAG↑G	↓GATC CTAG↑	CCC↓GGG GGG↑CCC

（3）荧光素酶在ATP的参与下，可使荧光素发出荧光．生物学研究中常利用“荧光素-荧光素酶发光法”来测定样品中ATP的含量．某研究小组对“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”进行了探究．
【实验材料】1×10^-8 mol/L ATP标准液、缓冲溶液、70mg/L荧光素溶液（过量）、浓度分别为10、20、30、40、50、60、70mg/L的荧光素酶溶液．
【实验结果】见图2．
【实验分析与结论】
①实验材料中缓冲溶液的作用是______．
为使结果更加科学准确，应增设一组浓度为______的荧光素酶溶液作为对照．除题目已涉及的之外，还需要严格控制的无关变量有______（至少写出一个）．
②由图2可知，______点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度．e、f、g点所对应的荧光素酶浓度不同，但发光强度相同，其主要原因是______．
（4）食品卫生检验中，可利用上述方法测定样品中细菌的ATP总含量，进而测算出细菌的数量，判断食品污染程度．测算的前提是每个细菌细胞中ATP的含量______．

Answer 1

（1）一个完整的基因表达载体除了目的基因、标记基因和复制原点外，还应包括启动子、终止子．（2）要获得目的基因必须在目的基因的两侧具有相应的酶切位点进行切割，图1中可以看出，BamHⅠ的酶切位点在目的基因的中...