某实验小组对某种品牌的牛奶中大肠杆菌的数量进行了测定，取3支灭菌的试管，分别加入9mL无菌水，标号为A1、A2、A3，从250mL牛奶中吸取1mL牛奶样液加入试管A1中，摇匀，然后另取一只吸管

Question

某实验小组对某种品牌的牛奶中大肠杆菌的数量进行了测定，取3支灭菌的试管，分别加入9mL无菌水，标号为A₁、A₂、A₃，从250mL牛奶中吸取1mL牛奶样液加入试管A₁中，摇匀，然后另取一只吸管从A₁中吸取1mL溶液，加入A₂中，摇匀，以此类推，最后从试管A₃中取0.1mL样液对平板进行涂布，鉴别并计数大肠杆菌菌落．对涂布的三个平板进行统计，大肠杆菌菌落数分别为35、34、42个．请回答下列问题：
（1）本实验中培养大肠杆菌除了必要的营养物质和琼脂外，还需在培养基中添加___．
（2）制备培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是___，倒平板时培养基的温度不能太低，原因是___．
（3）该实验小组接种大肠杆菌所采用的方法是___．根据三个平板中菌落数，可推测原250mL牛奶中大肠杆菌的浓度为___个/L（计算过程中液体混合时不考虑体积变化），该方法测定的大肠杆菌的含量和实际值相比，一般___（填“偏大”或“偏小”）
（4）为了使测量结果更加准确，该实验对照组的设置是___．
（5）若要用牛奶制作酸奶，接种___菌种．

Answer 1

（1）伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌，因此本实验中培养大肠杆菌除了必要的营养物质和琼脂外，还需在培养基中添加伊红美蓝．
（2）对培养皿灭菌的常用干热灭菌法；倒平板时培养基的温度不能太低，因为温度太低会导致培养基凝固，无法在培养皿中铺展均匀．
（3）接种微生物常用平板划线法或稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物的计数，因此该实验小组接种大肠杆菌所采用的方法是稀释涂布平板法．根据三个平板中菌落数，可推测原250mL牛奶中大肠杆菌的浓度为 (35+34+42)/(3)×10×10×10×10×10³=3.7×10⁸个/L；由于两个或多个细胞连在一起时，观察到的是一个菌落，因此该方法测定的大肠杆菌的含量和实际值相比，一般偏小．
（4）为了使测量结果更加准确，该实验对照组的设置是设一组没有涂布（接种）的培养基（或用等量无菌水涂布的培养基）．
（5）若要用牛奶制作酸奶，接种乳酸菌菌种．
故答案为：
（1）伊红美蓝
（2）干热灭菌法      温度太低导致培养基凝固，无法在培养皿中铺展均匀
（3）稀释涂布平板法    3.7×10⁸    偏小
（4）设一组没有涂布（接种）的培养基（或用等量无菌水涂布的培养基）
（5）乳酸菌