白花蛇舌草是我国民间常用的中草药，科学工作者用RPMI-1640培养基配制出不同浓度的白花蛇舌草提取物（HDE）工作液，分别处理人白血病细胞株（K562），测得线粒体内膜跨膜电位的变化如图

Question

白花蛇舌草是我国民间常用的中草药，科学工作者用RPMI-1640培养基配制出不同浓度的白花蛇舌草提取物（HDE）工作液，分别处理人白血病细胞株（K562），测得线粒体内膜跨膜电位的变化如图1，测得凋亡抑制基因Survivin和原癌基因Bcl-2表达的变化情况如图2．

（1）K562细胞是由于___基因发生突变，导致正常细胞的生长和分裂失控而变成癌细胞．
（2）图1中HDE处理___h后K562细胞内线粒体内膜跨膜电位下降最显著．跨膜电位下降影响线粒体的功能，导致___合成停止，并释放调亡诱导因子，最终引起细胞的凋亡或死亡．
（3）收集用HDE处理的K562细胞中Survivin和Bcl-2的mRNA，在___酶的作用下合成cDNA，再通过___技术扩增cDNA，然后测定其含量，结果如图2所示．其中对照组的处理是使用等量___．β-Actin基因在各组织和细胞中的表达相对恒定，在PCR中的作用是___．从图2数据可知，用HDE处理2周的K562细胞中Survivin和Bcl-2的表达___未经处理的细胞．
（4）综上所述，HDE可能通过___，抑制抗凋亡基因的表达，从而___K562白血病细胞增殖．
（5）如果白花蛇舌草没有明显的毒副作用，依据本实验的结果，用它制药的最佳用量是使人体的血药浓度达到___mL/L．

Answer 1

（1）K562细胞是一种癌细胞，具有无限增值的特点，是细胞内原癌基因发生突变，导致正常细胞的生长和分裂失控而变成癌细胞．
（2）图1中白花蛇舌草提取物HDE处理大约48 h后，K562细胞内线粒体内膜跨膜电位下降明显．从而影响线粒体的功能，导致细胞内ATP 合成停止，并释放调亡诱导因子，最终引起细胞的凋亡或死亡．
（3）实验组中获得的mRNA在逆转录 酶的作用下，通过逆转录过程可用合成cDNA，然后通过PCR 技术扩增cDNA，获得大量的cDNA．其对照组使用的是等量不含HDE的RPMI-1640培养基．根据题意分析β-Actin基因在PCR中起对照作用．从图2数据可知，用HDE处理2周的K562细胞中Survivin和Bcl-2的表达明显低于未经处理的细胞．
（4）根据以上分析控制HDE可能通过降低线粒体内膜跨膜电位，抑制抗凋亡基因的表达，从而抑制K562白血病细胞增殖．
（5）图中12.8效果最明显，即用它制药的最佳用量是使人体的血药浓度达到12.8mL/L．
故答案为：
（1）原癌
（2）48      ATP
（3）逆转录    PCR   不含HDE的RPMI-1640培养基对照明显低于
（4）降低线粒体内膜跨膜电位  抑制
（5）12.8