浸花法是拟南芥转化最常用的方法，对生长5〜6周已抽苔的拟南芥打顶来促进侧枝生长，待花序大量产生时将其在含有转化辅助剂Silwet和蔗糖的农杆菌溶液中浸泡几分钟，3〜4周后收取转化植

Question

浸花法是拟南芥转化最常用的方法，对生长5〜6周已抽苔的拟南芥打顶来促进侧枝生长，待花序大量产生时将其在含有转化辅助剂Silwet和蔗糖的农杆菌溶液中浸泡几分钟，3〜4周后收取转化植株的种子．在含有合适抗生素的平板上对种子进行筛选，能够健康生长的幼苗为转基因植株．这种转化方法不需要组织培养和再生植株的过程，操作简便、转化效率较高．回答下列问题：
（1）若要短时间内获得大量目的基因，可采用___技术；该技术用到的酶是___．
（2）基因工程中一般都需要构建基因表达载体，原因是___．
（3）使用农杆菌是因为它含有___能插入到拟南芥染色体DNA中，并且可以稳定的遗传给后代．目的基因整合到拟南芥染色体DNA中，引起的变异属于___．
（4）上述操作过程用到的受体有___．
（5）若要检测转基因拟南芥的染色体DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是___．

Answer 1

（1）PCR技术可在体外大量扩增目的基因；该技术是在较高温度下进行的，因此需要用到耐热的DNA聚合酶．
（2）基因工程中一般都需要构建基因表达载体，这可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能稳定表达和发挥作用．
（3）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上，导致基因重组．
（4）上述操作过程用到的受体有农杆菌、植物细胞．
（5）若要检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因可采用DNA分子杂交技术．
故答案为：
（1）PCR      耐热的DNA聚合酶
（2）使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能稳定表达和发挥作用 
（3）T-DNA      基因重组
（4）农杆菌、植物细胞
（5）DNA分子杂交技术