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如果你从刀豆中得到一种物质,很可能是脲酶,你怎样确定它是蛋白质,如何判断它是否是酶?
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如果你从刀豆中得到一种物质,很可能是脲酶,你怎样确定它是蛋白质,如何判断它是否是酶?
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答案和解析
第一步:首先判断此物质是否是蛋白质,如用双缩脲反应或其他蛋白质显色反应来进行鉴定.另外也可以用酸或碱水解,同时用甲醛滴定法来检测水解程度(此物质若是蛋白质则应有蛋白质的显色反应,酸碱水解时游离氨基酸的含量随时间而升高).
第二步:将此蛋白质加入到含有尿素的缓冲体系中进行催化反应,用奈氏试剂检测是否有氨的生成.将此蛋白质加热后再作此反应,检测是否还有氨的生成(此蛋白质若是脲酶则应有氨的生成,而蛋白质加热后则不再有氨的生成).
第二步:将此蛋白质加入到含有尿素的缓冲体系中进行催化反应,用奈氏试剂检测是否有氨的生成.将此蛋白质加热后再作此反应,检测是否还有氨的生成(此蛋白质若是脲酶则应有氨的生成,而蛋白质加热后则不再有氨的生成).
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