下表中列出了几种限制酶识别程序及其切割位点，图一、图二中箭头表示相关限制酶的酶切位点．（1）若图二中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的

Question

下表中列出了几种限制酶识别程序及其切割位点，图一、图二中箭头表示相关限制酶的酶切位点．


（1）若图二中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，科学家要将该基因注射到羊的___中，则发育成的羊能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁．
（2）限制酶SmaⅠ和限制酶XmaⅠ作用的不同点是___．
（3）图二中的目的基因D需要同时使用限制酶MseⅠ和限制酶PstⅠ才能获取，而图一所示的质粒无相应的限制酶切位点．所以在用该质粒和目的基因构建重组质粒时，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶切位点．试写出构建需要的限制酶切位点的过程（提供构建需要的所有条件）：
①首先用___酶处理质粒；
②然后用___酶处理质粒，使被切开的质量末端链接上相应的脱氧核苷酸
③再运用DNA连接酶处理质粒，形成新的限制酶切位点，即可被限制酶___识别．
（4）基因工程中的筛选是一个重要的步骤．如图表示运用影印培养法（使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种培养方法）检测基因表达载体是否导入大肠杆菌．培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有___、___．从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是___菌落中的细菌．

Answer 1

（1）若图二中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，科学家要将该基因注射到羊的受精卵中，则发育成的羊能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁．（2）限制酶SmaⅠ的识别序列是CCCGGG，...