蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值．某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤（配置了下列培养基，在适宜条件下培养）：步骤取样培养基

Question

蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值．某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤（配置了下列培养基，在适宜条件下培养）：

步骤	取样	培养基	培养结果
Ⅰ	土壤样品	葡萄糖，（NH4）2SO4，K2HPO4•3H2O，KH2PO4，NaCl，CaCl2， MgSO4•7H2O，加水定容	培养液a
Ⅱ	1mL培养液a	同上	菌落
Ⅲ	挑取单菌落	细菌培养基	培养液b

（1）为实现筛选目的，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除___并加入高浓度的___．
（2）为实现目的菌的分离和计数，步骤Ⅱ所使用的培养基中还应加入___制成平板，采用的接种方法是___，实验结果如图A．
（3）步骤Ⅲ应挑取图A中___处的菌落，本步骤的目的是___．

（4）图B是该蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性．在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60-70℃保温一定时间的，其作用是___．

Answer 1

（1）分析题意可知，实验目的是“筛选产蛋白酶的高产菌株”，因此为实现筛选目的，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除葡萄糖并加入高浓度的蛋白质即以蛋白质作为唯一碳源和氮源．
（2）为实现目的菌的分离和计数，培养基应选择固体培养基，固体培养基需要加入琼脂作为凝固剂；分析图A可知，培养基中的菌落均匀分布，因此采用的接种方法是稀释涂布平板法．
（3）根据题意和图A分析可知：a周围的透明圈最大，说明分泌的蛋白酶最多，所以大规模产业化首选的菌株是a．本步骤的目的是快速增加目的菌的种群数量（扩大培养）．
（4）根据题意和图B分析可知：在60～70℃时，其它酶的相对活性明显比蛋白酶的相对活性低，所以保温一定时间的作用是大幅度降低发酵液中其他酶的活性．
故答案为：
（1）葡萄糖     蛋白质
（2）琼脂       稀释涂布平板法
（3）a       快速增加目的菌的种群数量（扩大培养）
（4）大幅度降低发酵液中其他酶的活性