（2013•洛阳三模）科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力）．这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视．临床使用发现此蛋白质对肿瘤确有良好的疗效，可以通

Question

（2013•洛阳三模）科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力）．这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视．临床使用发现此蛋白质对肿瘤确有良好的疗效，可以通过基因工程技术导人大肠杆菌内进行大量生产，其过程大体如图甲；通过细胞工程还可以将抗肿瘤蛋白临床使用，如图乙是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有______（至少答两种）．
（2）图甲中，酶切此家蝇DNA分子和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端要满足______条件．
（3）将抗肿瘤基因导人大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于大肠杆菌______，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白．
（4）图乙中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是______细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过______次筛选．
（5）从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是______．
（6）图乙中，B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的______、聚乙二醇或电激等诱导．
（7）为检测图甲中的大肠杆菌细胞内是否成功表达了抗肿瘤蛋白，可以采用______法．

Answer 1

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有从基因文库中获取目的基因、PCR扩增目的基因、人工合成目的基因．
（2）基因表达载体的构建过程，需要DNA连接酶将目的基因与运载体连接起来，所以两者需要相同的黏性末端且能完全互补．
（3）选用大肠杆菌作为受体细胞，原因是：繁殖速度快，可以在短时间内获得要表达的蛋白质
（4）单克隆抗体的制备过程中，采用的是已免疫的小鼠B细胞，即经过注射特异性抗原，然后和骨髓瘤细胞的融合，而融合后会形成多种细胞，需要经过至少两次筛选，最终筛选出来的杂交瘤细胞，既能在体外条件下大量增殖，又能产生特异性抗体．
（5）给小鼠注射抗原可促进小鼠体 产生相应的浆细胞．
（6）动物细胞融合过程需要用灭活的病毒来诱导．
（7）检测蛋白质分子的方法是抗原-抗体杂交．
故答案为：
（1）从基因文库中获取目的基因、PCR扩增目的基因、人工合成目的基因  
（2）黏性末端能完全互补
（3）繁殖快、产量较高    
（4）B淋巴（浆）   2 
（5）（特异性）抗原  
（6）病毒（或仙台病毒）  
（7）抗原-抗体杂交