为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况．其基本流程如下图：（Amp表示

Question

为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况．其基本流程如下图：（Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达）

请回答问题：
（1）重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，___（填“需要”或“不需要”）启动子．
（2）步骤②中，用Ca²⁺处理大肠杆菌，使之成为___细胞，然后导入重组载体．实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有___基因．
（3）能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别．根据上述原理可以初步判断___（填“蓝色”或“白色”）菌落中的大肠杆菌为重组菌．
（4）将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与___形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况．

Answer 1

（1）由图可知，SHH基因插入在LacZ基因，LacZ基因被SHH基因插入后不表达，所以要使SHH基因表达就需要启动子．（2）大肠杆菌细胞用Ca2+处理后就成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞；要在添加氨苄青霉素的培养基...