人血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值．如图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径．（1）如果HSA基因序列未知，可以采用的方法获取该目的基因，为了使目的基因能够在宿主

Question

人血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值．如图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径．

（1）如果HSA基因序列未知，可以采用___的方法获取该目的基因，为了使目的基因能够在宿主细胞中复制和稳定保存，通常要先构建___后才能导入宿主细胞．
（2）方框中的“？”一般选用的生物是___，为了提高II过程的导入成功率，通常用___处理大肠杆菌．
（3）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性，所以，选择___途径（填I或II）获取rHSA更有优势．
（4）为了鉴定宿主细胞中是否产生rHSA，可以用___方法来进行检验．
A．检验HSA基因是否导入          B．检验细胞中是否产生相应的mRNA
C．抗原、抗体杂交                D．检测是否有标记基因．

Answer 1

（1）获取目的基因的方法有：从基因文库中获取、采用PCR技术扩增（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况下）、人工化学合成（适用于目的基因较小且序列已知的情况下）．因此如果HSA基因序列未知，可以采用从基因文库中提取 的方法获取该目的基因；为了使目的基因能够在宿主细胞中复制和稳定保存，通常要先构建基因表达载体（重组DNA）后才能导入宿主细胞．
（2）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，因此方框中的“？”一般选用的生物是农杆菌；将目的基因导入微生物细胞时常有感受态细胞法，即用氯化钙处理微生物细胞，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态．
（3）由于大肠杆菌是原核生物，其细胞中不含内质网和高尔基体，而人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性，所以，选择I途径获取rHSA更有优势．
（4）检测目的基因是否表达形成蛋白质可以采用抗原-抗体杂交法．
故答案为：
（1）从基因文库中提取    重组DNA     
（2）农杆菌      氯化钙
（3）I        
（4）C