人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取．由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重．如果应用一定的生物工程技术，将

Question

人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取．由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重．如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能．
大致步骤如下：
a．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成重组细胞①； 
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛．
请回答下列问题：
（1）步骤a中，获取的目的基因，在体外可通过______大量扩增，在导入雌性奶牛胚胎细胞前，需构建重组DNA，该过程需要的工具酶是______．
（2）步骤b利用的技术是______，胚胎工程操作中最后环节是______．
（3）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞．在培养过程中，必须用______处理内细胞团，使之分散成单个细胞，用于饲养层的细胞一般是______，为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的______．

Answer 1

（1）PCR技术可在体外大量扩增目的基因；构建重组DNA时，需先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，之后还需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA．
（2）由以上分析可知，步骤b利用的是核移植技术；转基因、核移植或体外受精等任何一项胚胎工程技术所获得的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，因此，胚胎移植是胚胎工程的最后一道“工序”．
（3）在动物细胞培养过程中，必须用胰蛋白酶处理内细胞团，使之分散成单个细胞；用于饲养层的细胞一般是胚胎成纤维细胞；为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素．
故答案为：
（1）PCR         限制酶（限制性核酸内切酶）、DNA连接酶
（2）核移植      胚胎移植
（3）胰蛋白酶     胚胎成纤维细胞      抗生素