PCR引物浓度一般选多少？进行PCR反应时的两条引物浓度选多少度合适?一般是多大范围？我把引物浓度稀释到10μmol/L，然后在50μL反应体系中加入1μL该浓度的引物，这样算来，在该次PCR反应

Question

PCR引物浓度一般选多少？进行PCR反应时的两条引物浓度选多少度合适?一般是多大范围？ 我把引物浓度稀释到10μmol/L，然后在50μL反应体系中加入1μL该浓度的引物，这样算来，在该次PCR反应中引物的终浓度是0.2μmol/L（200000pmol/L）。该浓度行吗？ 我之前做的所有PCR的引物浓度都是这么大，并且都没有扩增出条带。请问这是引物浓度原因吗？是因为引物浓度太大了吗？但是在紫外灯下观察琼脂糖胶的时候发现引物二聚体条带也不是太亮啊。 感谢您的回答，先谢谢！只要告诉我引物浓度一般选多大就行了，不胜感激。

Answer 1

我使用的引物一般稀释到10μM. 20微升体系每个引物加0.4微升即可。 你的50微升体系加1微升也不算多。 你降低下退火温度试一试。