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生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能降解尿素的细菌(目的菌).培养基成分如左表所示,实验步骤如右图所示.请
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生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能降解尿素的细菌(目的菌).培养基成分如左表所示,实验步骤如右图所示.请分析回答问题:
(1)培养基中加入尿素的目的是___,原理是___.从同化作用类型来看的,该菌属于___.
(2)实验需要振荡培养,原因是___.转为固体培养时,常采用___的方法接种,获得单菌落后继续筛选.
(3)在实验过程中:①培养基、培养皿;②玻棒、试管、锥形瓶、吸管;③瘤胃中液体.其中需要灭菌是___填序号).
(4)分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落.甲同学实验结果差异的原因可能有___(填序号)①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照
(5)以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后,加入___指示剂后变红色,说明“目的菌”能分解尿素.理由是___.
(6)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37°C恒温培养箱中培养24h~48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中___倍的稀释比较合适.
KH2PO4 | 1.4g |
Na2HPO4 | 2.1g |
MgSO4•7H2O | 0.2g |
葡萄糖 | 10g |
尿素 | 1g |
琼脂 | 15g |
溶解后自来水定容到1000mL |
(2)实验需要振荡培养,原因是___.转为固体培养时,常采用___的方法接种,获得单菌落后继续筛选.
(3)在实验过程中:①培养基、培养皿;②玻棒、试管、锥形瓶、吸管;③瘤胃中液体.其中需要灭菌是___填序号).
(4)分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落.甲同学实验结果差异的原因可能有___(填序号)①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照
(5)以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后,加入___指示剂后变红色,说明“目的菌”能分解尿素.理由是___.
(6)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37°C恒温培养箱中培养24h~48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中___倍的稀释比较合适.
稀释倍数 | 103 | 104 | 105 | 106 | 107 |
菌落数 | >500 | 367 | 248 | 36 | 18 |
▼优质解答
答案和解析
(1)该实验的目的是筛选到能高效降解尿素的细菌,因此培养基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的细菌(目的菌),不能分解尿素的细菌将因缺少氮源无法生长繁殖,因此从功能上看,该培养基属于选择培养基,从同化作用类型来看的,该菌属于异养型,需加入葡萄糖等有机碳源.
(2)目的菌生长繁殖需要的氮源来自尿素,碳源来自葡萄糖;由于分解尿素的菌是需要微生物,因此需要震荡培养,固体培养基上常用的接种方法是稀释涂布法和平板划线法.
(3)为了保证培养物不被污染,对培养细菌用的培养基与培养皿和玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管要进行灭菌,实验操作者的双手要进行消毒.
(4)由题意知,该同学与其他同学获得的菌落数差异很大,可能的原因是采用的土样不同,培养基灭菌不彻底,培养基被污染;或者是实验过程中没有进行无菌操作.
(5)尿素被分解尿素的菌氧化成氨气,氨气会使培养基碱性增强,PH升高,指示剂酚红变红,因此以通过在培养基中加入酚红指示剂,检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解.
(6)观察并统计菌落数应选30-300之间的进行统计,故应选106或105倍的稀释比较合适.
故答案为:
(1)筛选目的菌 只有能合成脲酶的细菌才能分解尿素,在该培养基上生长 异养型
(2)为目的菌提供氧气 涂布平板(划线)
(3)①②
(4)①②③
(5)酚红 微生物产生的脲酶能将尿素分解成氨,氨会使培养基的pH升高,使酚红指示剂变红
(6)106或105
(2)目的菌生长繁殖需要的氮源来自尿素,碳源来自葡萄糖;由于分解尿素的菌是需要微生物,因此需要震荡培养,固体培养基上常用的接种方法是稀释涂布法和平板划线法.
(3)为了保证培养物不被污染,对培养细菌用的培养基与培养皿和玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管要进行灭菌,实验操作者的双手要进行消毒.
(4)由题意知,该同学与其他同学获得的菌落数差异很大,可能的原因是采用的土样不同,培养基灭菌不彻底,培养基被污染;或者是实验过程中没有进行无菌操作.
(5)尿素被分解尿素的菌氧化成氨气,氨气会使培养基碱性增强,PH升高,指示剂酚红变红,因此以通过在培养基中加入酚红指示剂,检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解.
(6)观察并统计菌落数应选30-300之间的进行统计,故应选106或105倍的稀释比较合适.
故答案为:
(1)筛选目的菌 只有能合成脲酶的细菌才能分解尿素,在该培养基上生长 异养型
(2)为目的菌提供氧气 涂布平板(划线)
(3)①②
(4)①②③
(5)酚红 微生物产生的脲酶能将尿素分解成氨,氨会使培养基的pH升高,使酚红指示剂变红
(6)106或105
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