下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题：（1）一个如图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有个游离的磷酸

Question

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题：

（1）一个如图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有______个游离的磷酸基团．
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越______．
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SrnaⅠ切割，原因是______．
（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止______．
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入______酶．
（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了______．
（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在______的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测．

Answer 1

（1）由于质粒在切割前是一个环状DNA分子，因此上面没有游离的磷酸基团；当质粒被切割后形成了两个末端各有1个游离的磷酸基团，故共有2个游离的磷酸基团． （2）SmaⅠ酶切位点越多，表示G和C这一对碱基对所占的比例...