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在用高效液相色谱仪时,我们那个定量管是2mL的,是不是意味着我每次都要进样2mL.而且进样之前管道是空的,就这样进样空气会不会进入柱子?
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在用高效液相色谱仪时,我们那个定量管是2mL的,是不是意味着我每次都要进样2mL.而且进样之前管道是空的,就这样进样空气会不会进入柱子?
▼优质解答
答案和解析
请问你是使用什么牌子的高效液相色谱仪?我使用过安捷伦的和岛津的,定量管2ML但是实际进样量是根据你自己在仪器中设置的,一般为10-20UL,如果管道是空的那么不要上色谱柱,先用超声过的纯化水清洗系统,再根据所选择的色谱柱来选择下一个清洗系统的溶剂,如果你需要的流动相为乙腈那么使用甲醇清洗系统,也可以用乙腈,但是乙腈的价格是甲醇的4倍,所以一般用甲醇,冲洗完毕后上柱子,先脱气,然后再使用需要的流动相冲洗液（根据柱子来选择冲洗的液体）冲洗.一般冲洗的体积为柱子的10倍体积即可.然后上流动相和样品,再脱气,即可进样.（在任意一次断开系统循环之后一定要脱气,否则会引起走样的基线不稳或出现鬼峰或损伤色谱柱）特别要注意以下两种色谱柱冲洗液的选择（1.葡聚糖网状分子作为色谱柱的,不可使用有机溶剂清洗2.禁用水系溶剂的色谱柱）前一种情况会导致葡聚糖网状分子破裂,堵塞管路,后者会破坏色谱柱.都是极为麻烦的情况.现在的仪器都是自动进样的,在超声脱气和系统自动排气双保险之后基本没有空气进入柱子的可能,纯手打,
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