为了调查某市自来水水源地的水质情况，某研究小组对该地自来水水样中的大肠杆菌进行了测定，请回答下列问题：（1）该小组采用平板划线法分离提纯水样中的细菌，划线时在培养基上共

Question

为了调查某市自来水水源地的水质情况，某研究小组对该地自来水水样中的大肠杆菌进行了测定，请回答下列问题：
（1）该小组采用平板划线法分离提纯水样中的细菌，划线时在培养基上共画了4个区域，则需要
___次灼烧接种环．在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是___．
（2）如果是用试管培养微生物，在培养基凝固前要搁置斜面，其目的是___．接种时需在酒精灯火焰旁操作的原因是：___．
（3）检测自来水中大肠杆菌，若其中加入蛋白胨，蛋白胨能提供的主要营养有___．该研究小组在统计菌落数目时，为防止因培养时间不足而遗漏菌落数，应培养至___时，再计数．
（4）若用稀释涂布平板法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是___．
将1ml自来水稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1ml稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、43、44，据此可得出每升溶液中大肠杆菌活菌数为___．
（5）若要测定培养液中的菌体数，也可在显微镜下用___直接计数．

Answer 1

（1）采用平板划线法纯化微生物时，每次划线之前都要灼烧接种环，划线结束后还需灼烧接种环，若划线时在培养基上共画了4个区域，则需要5次灼烧接种环；每次划线前都要灼烧接种环的目的是杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，这样可以将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．
（2）如果是用试管培养微生物，在培养基凝固前要搁置斜面，其目的是扩大接种面积．接种时需在酒精灯火焰旁操作，这是为了避免周围环境中微生物的污染．
（3）培养基中加入的蛋白胨能提供的主要营养有碳源、氮源和维生素．该研究小组在统计菌落数目时，为防止因培养时间不足而遗漏菌落数，应培养至菌落数目稳定时，再计数．
（4）若用稀释涂布平板法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．
将1ml自来水稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1ml稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、43、44，据此可得出每升溶液中大肠杆菌活菌数为(42+43+44)/(3)×100×(1)/(0.1)×1000=4.3×10⁷个/L．
（5）若要测定培养液中的菌体数，也可在显微镜下用血细胞计数板直接计数．
故答案为：
（1）5    将聚集的菌体逐步稀释以获得单个菌落
（2）扩大接种面积    为避免周围环境中微生物的污染
（3）碳源、氮源和维生素         菌落数目稳定（必须说出数目，菌落稳定不给分）
（4）检测培养基平板灭菌是否合格       4.3×10⁷个/L
（5）血细胞计数板