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探究如何从土壤中分离探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数.实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多.将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养.在这种

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探究如何从土壤中分离
探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数.
实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多.将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养.在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖.用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来.
材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9mL无菌水的大试管若干.无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱.
方法步骤:
(1)倒平板.分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在___________操作.
(2)制备土壤稀释液.取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀.用无菌移液管吸取上清液1mL,转至9mL无菌水的大试管中,依次稀释到10 7 倍稀释度.为实现无菌操作,试管口和移液管应在离火焰____cm处.
(3)涂布.按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布____个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布____个平板.
(4)培养.放入恒温箱内,在适宜温度条件下培养3d~4d.一般每隔____小时统计一次,选取____时的记录作为结果,这样可以防止____.
(5)细菌的计数.当菌落数目稳定时,选取菌落数在___________的平板进行计数.如果测试的平均值为50,则每克样品中的菌落数是___________.(稀释度是10 5 )
(6)预期结果.相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数____(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目.理由是______________.
▼优质解答
答案和解析
(1)酒精灯火焰旁
(2)1~2
(3)3     1
(4)24      菌落数目稳定     因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目
(5)30~300     5×10 7
(6)多于      无氮培养基上可以生存和繁殖的只是土壤中的固氮菌,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类的生存
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