甲醛是一种来源广泛的挥发性有机污染物，具有强烈的致癌和致畸作用，利用微生物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点．图甲为采集活性污泥作为优良菌源，通

Question

甲醛是一种来源广泛的挥发性有机污染物，具有强烈的致癌和致畸作用，利用微生物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点．图甲为采集活性污泥作为优良菌源，通过筛选分离出能以甲醛为唯一碳源的高效降解菌的实验过程．请分析回答下列问题：

（1）上述实验材料中，不需要进行灭菌处理的是___，培养基灭菌的常用方法为___．该实验③过程所用的选择培养基只能以甲醛作为唯一碳源，其原因是___．
（2）由③一④的分离活性污泥中细菌的接种方法（如图乙）为___法，接种时，接种环通过___灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样做的目的是___．
（3）图乙表示在平板培养基上的第一次和第二次划线，请在图乙中画出第三次划线．
___
（4）为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响，进行了相应实验．当甲醛的初始浓度小于1200mg/L时，菌株可以完全降解甲醛；当甲醛的初始浓度增高至1 600mg/L时，48h后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是___．
为了使该实验所得结果准确可靠，还应该设置___的对照实验，以排除甲醛自然挥发对实验结果的干扰．

Answer 1

（1）在微生物的培养过程中应该进行无菌操作，由于该实验是从活性污泥中分离菌种，因此对于活性污泥不能灭菌，培养基灭菌的常用方法为高压蒸汽灭菌法．③过程的培养基是无机固体培养基上加入甲醛，甲醛是该培养基的唯一碳源，甲醛的作用是为能分解甲醛的微生物提供碳源，同时甲醛能抑制其他微生物的生长．
（2）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是；将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落．
（3）第三次划线应该从第二次划线的末端开始，并且不与第一次划线接触，答案如图：

（4）甲醛能使蛋白质变性，过高的甲醛浓度可以使分解甲醛的菌体白质变性，从而降低了细菌降解甲醛的能力，因此如甲醛浓度过高，菌株对甲醛的能力降低；甲醛具有挥发性，甲醛挥发会对实验结果造成影响，为了使该实验所得结果准确可靠，还应该设置不接种甲醛降解菌的对照实验，以排除甲醛自然挥发对实验结果的干扰．
故答案为：
（1）活性污泥     高压蒸汽灭菌    甲醛能够提供碳源、抑制其他微生物的生长
（2）平板划线法    灼烧     将聚集的菌体逐渐稀释以便获得单个菌落
（3）

（4）甲醛浓度过高会使菌体蛋白质变性，从而降低了细菌降解甲醛的能力（或甲醛浓度过高会产生毒害作用，降低了细菌降解甲醛的能力）          不接种甲醛降解菌