我国宫颈癌发病率已高居世界第二位且发病年轻化趋势明显，宫颈癌与HPV（人乳头瘤病毒，一种DNA病毒）的病毒感染密切相关．雷公藤红素是一种具有良好的抗癌效果的新型抗癌药物，水溶

Question

我国宫颈癌发病率已高居世界第二位且发病年轻化趋势明显，宫颈癌与HPV（人乳头瘤病毒，一种DNA病毒）的病毒感染密切相关．雷公藤红素是一种具有良好的抗癌效果的新型抗癌药物，水溶性差（必须用DMSO作为溶剂溶解）．

（1）宫颈癌的早期检查包括宫颈细胞学检查（TCT）和HPV病毒感染检查．TCT检查即在显微镜下观察是否出现角化细胞或凹空细胞，因为癌细胞具有___ 特点；HPV病毒感染检查即利用核酸分子杂交方法，观察是否___，确定是否感染HPV病毒；
（2）为了探究雷公藤红素的抗癌效果，研究人员进行了实验：将人宫颈癌HeLa细胞系接种于动物细胞培养液后置于___中进行培养，用___处理，得到细胞悬浮液用于实验．用不同浓度的雷公藤红素处理HeLa细胞，对照组添加等量的___，其他条件相同且适宜．定期取样并测定细胞数量的相对值，结果如图1所示，由图可知___．
（3）研究人员进一步研究雷公藤红素的作用机理，进行了如下实验．
①由图2可知，经雷公藤红素处理后，HeLa细胞处于___期的含量明显增多，说明雷公藤红素的作用可能是___；

②测定HeLa细胞在不同浓度雷公藤红素处理后的凋亡情况，结果如表：

雷公藤浓度（µM）	0	2.5	5	10
凋亡率（%）	4.28	7.22	37.3	34.8
Bax蛋白含量	+	++	++++	++++
Bcl-2蛋白含量	++++	++	+	+

由表格数据可知，雷公藤红素可以___细胞凋亡，这种作用可能是通过___实现．
（4）研究还发现经雷公藤红素处理后，癌细胞中产生更多的乳酸，导致对丙酮酸的消耗增加，相应地进入___（细胞结构）的丙酮酸减少．处理后HeLa细胞的相关结构受损，所以___作用增强，有助于弥补能量供应的不足，进一步验证了上述实验结论．

Answer 1

（1）宫颈细胞学检查（TCT）检查即在显微镜下观察是否出现角化细胞或凹空细胞，因为癌细胞具有形态结构发生改变 特点；HPV病毒感染检查即利用核酸分子杂交方法，观察是否出现杂交带，确定是否感染HPV病毒．
（2）将人宫颈癌HeLa细胞系接种于动物细胞培养液后置于CO₂培养箱中进行培养，用胰蛋白酶处理，得到细胞悬浮液用于实验．用不同浓度的雷公藤红素处理HeLa细胞，由于“雷公藤红素水溶性差，必须用DMSO作为溶剂溶解”，因此对照组应添加等量的DMSO，其他条件相同且适宜．定期取样并测定细胞数量的相对值，结果如图1所示，由图可知雷公藤红素对细胞增殖有抑制作用；随雷公藤红素浓度增加，抑制作用增强；10µM的剂量对HeLa细胞的增殖抑制最为显著．
（3）①由图2可知，经雷公藤红素处理后，和对照组相比，实验组中HeLa细胞处于S和G2期的含量明显增多，说明雷公藤红素的作用可能是能够抑制DNA的复制和相关蛋白的合成（能够抑制细胞分裂）．
②由表格数据可知，雷公藤红素可以诱导细胞凋亡，并且随着雷公藤红素浓度的升高，Bax蛋白含量升高，而Bcl-2蛋白含量下降，因此这种作用可能是通过促进Bax蛋白表达量和抑制Bcl-2蛋白表达量实现．
（4）研究还发现经雷公藤红素处理后，癌细胞中产生更多的乳酸，导致对丙酮酸的消耗增加，相应地进入线粒体的丙酮酸减少（即有氧呼吸减弱）．处理后HeLa细胞的相关结构受损，所以无氧呼吸作用增强，有助于弥补能量供应的不足，进一步验证了上述实验结论．
故答案为：
（1）形态结构发生改变    出现杂交带
（2）CO₂培养箱   胰蛋白酶    DMSO
雷公藤红素对细胞增殖有抑制作用；随雷公藤红素浓度增加，抑制作用增强；10µM的剂量对HeLa细胞的增殖抑制最为显著
（3）①S和G2  能够抑制DNA的复制和相关蛋白的合成（能够抑制细胞分裂）
②诱导通过促进Bax蛋白表达量和抑制Bcl-2蛋白表达量
（4）线粒体   无氧呼吸